第八章真核基因表达调控精品.pptVIP

2、真核生物mRNA的特征 ● 5’ 端存在“帽子”结构 ●多数mRNA 3’ 端具有poly（A ）尾巴（组蛋白除外） ●以单顺反子的形式存在 原核生物和真核生物mRNA结构的比较 6.4.5 mRNA3′---UTR( untranslated region) 1 、控制mRNA的降解 在许多哺乳动物和酵母的mRNA的降解过程中，去除ploy(A)是首要的关键的一步，ploy(A)尾部的缩短率由位于编码区内的顺式作用元件所调节，存在于许多高度不稳定的哺乳动物的mRNA3′---UTR内的AU富集元件就是一个常见的序列，它介导mRNA的降解，是决定mRNA稳定性的重要因素。 对mRNA3′---UTR的保守序列介导的mRNA的降解的机制目前所知较少，但有人提出AU富集元件介导的降解的一般模式可能有普遍意义。 AU富集元件结合蛋白及其辅助因子与靶序列结合，激活去ploy(A)，形成中间体，最终由核酸内/外切酶降解，从而使mRNA得以更新。 2、 介导翻译调控 （1）体内蛙卵母细胞和体外网织红细胞抽提物实验表明带有ploy(A)尾的mRNA的翻译频率明显高于脱尾的mRNA， ploy(A)尾对翻译的影响与其长度成正比关系，当少于20个碱基时， mRNA的活性迅速降低。 （2） ploy(A)促进翻译还必须有与其结合的蛋白(ploy(A)结合蛋白）， ploy(A)与ploy(A)结合蛋白结合形成的复合物对翻译起始复合物的形成有重要的作用，但几具体机制仍不明确。 （3）此外，此尾部结构与mRNA的稳定性有关，也与病毒的侵染有关。 mRNA3′---UTR中的某些元件与蛋白因子相互作用而调控翻译，果蝇的性状决定基因mRNA的翻译有赖于它们在胚胎细胞前后轴上的定位，此定位是由mRNA3′---UTR所决定；在小鼠精子的发生过程中，精蛋白mRNA由转录形成后，需在精原细胞细胞质内储藏3到7天才被翻译，这是由精蛋白的mRNA3′---UTR所控制的；所有这些研究表明mRNA3′---UTR不仅调控翻译产物，而且控制翻译发生的时间、地点。 3、控制某些特殊遗传密码的辨认 在密码子表中没有密码与硒代半胱氨酸对应，在真核生物中，硒代半胱氨酸由位于mRNA编码框内的UGA密码子所编码，而它在一般情况下是终止密码子，此时，它所编码的罕见氨基酸的功能就是由mRNA3′---UTR内的硒代半胱氨酸插入序列所指导的。 4、终止密码子的选用 研究表明，通用的终止密码子虽然有三个，但是，它们在不同的真核生物中出现的频率是不同的，脊椎动物和单子叶植物中使用频率最高的是UGA,其他真核生物中主要使用UAA,而UGA的使用频率最低，终止密码子的选用与mRNA中GC的含量有关，赖氨酸的密码子AAG经常出现在终止密码子的5′端位置，但其作用不明。 5、UA 序列的作用 UA 序列是终止密码子与polyA之间的非编码区的一部分保守序列，一些细胞因子（生长因子）的 mRNA3′UTR中含有相间分布的UUAUUUAU8核苷酸组成的保守序列，UA序列是蛋白质翻译的终止的协同信号，又是抑制翻译起始的元件，UA序列作为一些低效起始因子的结合元件，通过再与起始复合物相互作用而抑制翻译，其抑制效率随其在mRNA3′UTR中拷贝数的增加而增高，但他抑制的步骤仍不清楚。 6.4.6 mRNA稳定性 mRNA的稳定性也就是其寿命，原核生物的mRNA寿命较短，半衰期约为3分钟，高等真核生物的细胞中mRNA的半衰期平均为3小时。寿命的长短除决定与其内在因素（如二级结构）外，还与转录后的修饰有关，而且不同的mRNA会与不同的蛋白质结合形成mRNP，mRNA寿命的长短可改变细胞内某种mRNA的浓度，因而改变了蛋白质的合成速度。 1、mRNA5′帽子结构与mRNA的稳定性 绝大多数真核生物的mRNA5′有帽子结构，可以增加mRNA的稳定性，保护其免遭核酸外切酶的攻击，帽子结构是前体mRNA在细胞核内稳定的因素，同时也是在细胞质内稳定的因素。 2 、mRNA3′poly(A)与mRNA的稳定性 mRNA3′poly(A)的长度一般为40---200个碱基，在转录后加上poly(A)短的mRNA的寿命也短。 实验：若用大肠杆菌的多核苷酸酶处理珠蛋白的mRNA，除掉poly(A），然后将有poly(A）和没有 poly(A）的两种mRNA分别注射入非洲爪蟾的卵母细胞，观察他们合成珠蛋白的能力，发现： （1）在注射后30到40分时，利用二者合成蛋白质基本无差异； （2）但在1小时后，没有poly(A）尾部的mRNA合成的蛋白质急剧减少； （3）到56小时，有 poly(A）的合成