表面增强拉曼技检测环境中病原微生物的研究.pdfVIP

摘 要 Raman 表面增强拉曼散射(Surface．enhanced 一种特殊的表面光学现象，灵敏度高，选择性强，特异性好，在粗糙表 面能够增强吸附分子的拉曼信号，因此已被广泛应用于医学，生物化学， 微生物学，环境，考古等多个领域。随着生物技术的发展及微生物污染 的严重化，利用SERS技术检测病原微生物的研究也越来越多。 本论文的研究内容和结论主要包括以下几个方面： 1．利用柠檬酸钠作为还原剂，对传统制备银溶胶的方法加以改进合成 纳米银颗粒；然后在制备的银溶胶里加入氯金酸和盐酸羟胺溶液制备银 核金壳纳米颗粒；利用两种不同的晶种子还原法制备纳米金颗粒；对这 三种纳米颗粒进行TEM表征，并以对巯基苯甲酸作为标记分子研究它们 的SERS活性，结果表明银核金壳的拉曼信号要比银溶胶和金溶胶的信号 强，不同晶种子法制备的金纳米颗粒拉曼光谱和尺寸都有差别。 核酸探针，选取嗜肺军团菌mip致病基因片段，采用“三明治结构’’检 测嗜肺军团菌。通过两次杂交测拉曼信号，实验发现杂交样品有良好的 拉曼信号而空白样品没有信号。 3．利用柠檬酸钠作为还原剂，对传统制备银溶胶的方法加以改进合成 纳米银颗粒，以它作为基底，并在“whole-organism 的基础上，以整个大肠杆菌和志贺氏菌为研究对象，通过和纳米银颗粒 混合制片，利用表面增强拉曼效应检测并区分大肠杆菌和志贺氏菌。结 果表明，未与纳米银颗粒混合的大肠杆菌和志贺氏菌没有明显的拉曼信 号，而与纳米银颗粒混合后拉曼信号得到增强，有明显的拉曼信号，并 且两种菌的拉曼信号有明显的区别。然后做了重现性实验，拉曼信号重 现性良好。实验能够鉴别大肠杆菌和志贺氏菌，可以为检测病原体研究 及实际应用提供依据。 关键词：表面增强拉曼散射；嗜肺军团菌；大肠杆菌：志贺氏菌：银溶 胶；金溶胶；银核金壳纳米颗粒 Ⅱ 基于SERS技术榆测病原微生物的研究 Abstract Surface-enhancedRaman a surface scattering(SERS)isspecial optical shows and for high specificity phenol-menon．Itsensitivity，selectivity the substratesand themoleculesabsorbedon surfaceofthemetal detecting Ramaninformationofthemolecule plentiful presents SERShasbeen usedin widely and the of otherfields．With environment，archaeology development andmicrobial and of biotechnology contamination，detection SERSisalso mainresults pathogenicmicroorganismsusing