固定化酶技术精品.pptVIP

（2）通过“体外循环”做成人工脏器 固定化酶也可做成“人工脏器”参与体外循环， 应用有两方面： 用于除去有害的毒性物质及有潜在毒害作用的代谢产物 除去氨基酸，使需要这些物质的病变组织“饿死”；治疗时只需将患者的血液引出体外，通过由固定化酶等构成的“人工脏器”加以处理，然后再回流体内。 实例： A. 消血栓： 纤溶酶是异源蛋白质，在人体内引起免疫反应，无法长期使用。 酶的不稳定性使其在较短的时间内失活。 用包埋法制备的酶固定化技术可克服上述弊端，酶在囊中不能漏出，小分子物质能自由进出。 B.人工肾 将病人血液中的尿素经脲酶水解成氨，再用活性炭吸附。即：用微胶囊固定化脲酶和活性炭组成人工肾。 5 发展趋势及建议 随着生物技术的迅速发展，固定化酶在食品工业中的应用日益广泛，但并不是说可以使用酶的地方，都可以用固定化酶来代替。在使用固定化酶技术时，也需要综合考虑其制备工艺、酶回收率、可操作性、稳定性及生产成本等方面的因素。我国目前食品加工企业使用该技术的现状是，固定化酶的操作方法复杂、稳定性较差，成本过高或使用了有毒的化学试剂而不符合食品加工所要满足的经济和安全标准，这些都限制了固定化酶技术的发展和应用，急需探索新型载体和改进固定化方法。但已有的成功经验也向我们展示了固定化酶技术在食品加工领域的具大潜力，因此我们相信，固定化酶技术将在食品领域有更加光明的前景。 污泥的处置方式往往是简单处理后填埋， 具有很大的环境风险。固定化酶技术可用来处理污泥。据报道，嗜热溶菌酶溶解法可以实现活性污泥法中剩余污泥的零排放。在剩余污泥中接种嗜热菌，有研究考察了 不同温度下VSS、TSS、蛋白质等的溶解情况， 认为嗜热菌分泌的胞外酶能有效促进悬浮固体及蛋白质的溶解。利用固定化酶技术处理剩余污泥也有发展潜力。 酶在生产生活中发挥了重要的作用, 固定化技术作为酶工程的核心有着不可限量的活力, 固定化技术的出现使酶工业得以迅速发展。在理论及实际应用上, 酶固定化技术克服了游离酶的许多缺点, 经各国学者的不断的努力, 固定化技术在各个领域取得了卓越的成效。而目前我国固定化酶制剂应用到工业生产的实例却很少, 因此固定化酶的研究开发任重道远。国内外大量的研究证实, 固定化酶技术目前还存在固定效率低、载体的有毒性、成本高、稳定性差、不能大规模生产等问题, 这些都限制了固定化酶技术的发展与应用。随着生物技术及材料、化工等各相关学科的不断发展, 固定化酶的工作会有新的突破。将更多固定化酶取得工业化规模的应用,仍然是固定化技术领域追求的目标。 将水溶性酶或游离细胞经过化学或物理手段处理，将酶束缚在一定的空间内，限制酶分子在此区间进行活跃的催化作用，成为不溶于水的固定化的酶或细胞。 固定化酶技术 1 原理 2 特点 3 制备方法 4 应用 5 发展趋势及建议 水溶性酶 1 原理 水不溶性载体 固定化技术 水不溶性酶 （固定化酶） 2 特点 稳定性高； 酶可反复使用； 产物纯度高，极易将固定化酶与底物、产物分开； 固定化酶的反应条件易于控制 生产可连续化和自动化，节约劳动力； 设备小型化、可节约能源。 固定化酶同自由酶相比，具有以下优点： 缺点： 固定化所需载体和试剂较贵，成本高，投资大 固定化时，酶活力有损失 长期生产，易污染，载体易降解，酶易失活 只能用于可溶性底物，较适用于小分子底物，对大分子底物不适宜 与完整菌体相比不适宜于多酶反应，特别是需要辅助因子的反应 3 制备方法 必须注意维持酶的催化活性及专一性。 酶与载体的结合部位不应当是酶的活性部位（酶活性中心的氨基酸残基不发生变化） 避免那些可能导致酶蛋白高级结构破坏的条件。 由于酶蛋白的高级结构是凭借氢键、疏水键和离子键等弱键维持，所以固定化时要采取尽量温和的条件，尽可能保护好酶蛋白的活性基团。 基本原则： 固定化应该有利于生产自动化、连续化。 载体能抗一定的机械力。 固定化酶应有最小的空间位阻。 酶与载体必须结合牢固，利于固定化酶的回收及反复使用。 固定化酶应有最大的稳定性，所选载体不与废物、产物或反应液发生化学反应。 固定化酶成本要低，以利于工业使用。 3.1 固定化酶的传统制备方法 3.1.1吸附法 吸附法是利用物理吸附法，将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是：工艺简便及条件温和，包括无机、有机高分子材料，吸附过程可同时达到纯化和固定化；酶失活后可重新活化，载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大，有活泼的表面。 3.1.2包埋法 　　包埋固定化法是把酶固定聚合物材料的格子结构或微囊结构等多空载体中，而底物仍能渗入格子或微囊内与酶相