sufr系统中生物多样性及稳定性的试验研究.pdfVIP

Ph.D. Dissertation of Chongqing University Experimental Research on Microbial Diversity and Stability of SUFR System Ph. D. Candidate: Ye Jiangyu Supervisor: Prof. Luo Guyuan Major: Environmental Engineering Faculty of Urban Construction and Environmental Engineering Chongqing University April 2007 摘 要 螺旋升流反应器（Spiral Up-Flow Reactor, SUFR ）是一种新型污水处理反 应系统，系统中的螺旋推流流态能提高基质的浓度梯度，为多种微生物提供了相 对固定的生态位，其间以传统纯培养法尚不能培养和鉴定的部分微生物对系统处 理效果起着重要作用。 论文通过对 SUFR 系统污水微生物培养的深入研究，首次系统和完整地分析 了污水及 SUFR 系统中微生物低可培养性和复苏障碍，创立了一种促进污水微生 物培养的新方法—“近自然纯培养法” （发明专利 ZL 200410037037.8）。利用微生 物技术及分子生物学手段，在全面分离、纯化和鉴定微生物种群的基础上，着重 对 SUFR 系统中微生物的多样性、稳定性进行了深入研究。通过对聚磷菌染色和 吸/释磷盐分析，寻找到部分 PAOs 和非 PAOs 菌群，获得了目前尚未见报道的聚磷 菌新种属，并用 16SrRNA 法初步鉴定为一株 Tsukamurella spp. 。在此基础上，论 文同时对 SUFR 系统微生物的种群动态、生态因子影响、稳态分析等进行了探索， 分析了 SUFR 系统在 DO 、pH 值、低温（5～20 ℃）等生态因子影响下运行时的种 群动态，获得 SUFR 系统部分种群得特征和动态资料，验证了部分假说，为完善 和完整解读 SUFR 系统提供了基础。 论文的主要研究的内容及成果如下： 创立近自然纯培养法，从 SUFR 系统中共分离到细菌 34 种，初步鉴定和研究 了21 种。采用 16S rRNA 法获得了主要 PAOs 种群的基因序列，最终鉴定为微杆 菌属、芽孢杆菌属、家村氏菌属等。 对系统中微生物群落采样研究发现，其中约 20 ％的微生物可用常规纯培养方 法培养出来。在纯培养的环境中，微生物共同协作的自然生存方式崩溃、长期高 度自然适应性与纯培养猝然营养变化的冲突、种群依赖性与隔绝式纯培养的冲突 和生态位急剧变化的冲突等是 SUFR 系统微生物可培养性低的主要原因。 采用染色方法对聚磷菌进行了聚合物（PHB 和 Poly-P ）聚积情况研究，并作 为聚磷菌鉴别实验的定性依据之一。与吸/释放磷酸盐实验结合，判定了 12，22 ， 23 ，29 ，44 ，48 号等菌株具有聚磷菌特征。对聚磷细菌进行吸/释磷实验时，利用 乙酸盐作碳源比葡萄糖试验效果更佳。 不同 DO 对 SUFR 系统中微生物分布有较大影响，分离到微生物种群以厌氧 带微生物可培养性最强，多为异养发酵细菌类型。但指纹图谱却表现出 DO 相似 性较高，这说明 DO 主要影响细菌的生理活性，很多细菌是处于活的但不能在实 验室鉴定和培养状态。入水 pH 值对 SUFR 反应器的菌群结构有较大影响，特别是 I 对 PAOs/GAOs 比的影响较大。低温的冲击会影响到菌群结构，聚类分析表明低温 冲击后优势菌群变得单一，但仍维持了系统的稳定运行；在温度回升后，反应器 中优势菌群得到迅速恢复，同时增强了系统功能。 试验发现并证实，SUFR 系统经过长时间稳定运行，系统中具有丰富的微生物 多样性，优势菌群稳定，有较明显的反硝化除磷现象，部分解决反硝化细菌与聚 磷菌对碳源竞争的矛盾，为该系统优良的除磷脱