《第2章 实验室设备及培养条件 》.pptVIP

第二章 实验室设备和培养条件 第一节 实验室设计 在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。 第一节 实验室设计 实验室的大小取决于工作的目的和规模： 1. 以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产影响效率。 2.在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来设计 避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。 植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。 实验室设计 标准的组织培养实验室包括： 洗涤室（准备室） 配置室 灭菌室 接种室 培养室 观察室等 实验室设计 1. 准备室 器具的洗涤、干燥、消毒。 2. 配置室 进行药品的保存、配置、消毒、分装 等。 3. 灭菌室 培养基及使用器具的消毒与灭菌 4. 接种室 进行材料的接种，内置超净工作台或 接种箱。外设缓冲间,放置拖鞋、 工作服、工作帽等。 5. 培养室 将接种的材料进行无菌培养生长的 场所 6. 细胞学观察实验室 进行培养材料的组织学、 细胞学、观察照相等 。 第二节 基本仪器设备与用品  （一）仪器设备 1.超净工作台(cleaning table): 用于培养物的无菌操作（由鼓风机、滤板、操作台、紫外灯和照明灯组成）。 超净台分水平式和垂直式二种型号 2. 高压灭菌锅（手提式、立式或卧式） 用于进行培养基和器械用具的灭菌。小规模实验室可选用小型手提式高压灭菌锅。 仪 器 设 备 仪 器 设 备 3.恒温培养箱: 用于植物材料的培养，其内有温度感受器，控制箱内温度到所调指标。生化培养箱还配有光照装置。 4. 电子分析天平和托盘天平： 电子分析天平，用于称取大量元素、微量元素、维生素、激素等微量药品精确度为0．0001g；托盘天平用于称取用量较大的糖和琼脂等，其精确度为0.1g。天平应放置在干燥、不受震动的天平操作台上。 仪 器 设 备 仪 器 设 备 5. 酸度计： 组织培养中培养基pH值的准确度是十分重要的，应当使用酸度计，若无酸度计，也可使用pH试纸进行粗测。首次使用酸度计前，应用标准液调节定位，然后固定。测量pH值时，待测液必须充分搅拌均匀。如果培养基温度过高，测量时要调整pH值计上的温度扭使之和培养基温度相当。 6. 烘箱： 用于干燥洗净的玻璃器皿，也可用于干热灭菌和测定干物重。用于干燥需保持80-100℃；进行干热灭菌需保持150℃，达1-3h；若测定干物重，则温度应控制在80℃烘干至完全干燥为止。 仪 器 设 备 仪 器 设 备 7. 培养架：放置培养材料。 8. 紫外线杀菌灯：杀菌。 9. 不锈钢托盘： 10. 定时器：控制光照时间。 11.普通冰箱：主要用于贮存母液、各种易变质、易分解的化学药品以及植物材料等 12. 大型工作台: 其高度应方便配制工作。 13. 药品柜: 用于放置常用药品。 14. 解剖镜：种类较多，用于分离微茎尖可采用双筒实体解剖镜。解剖镜上带有照相装置，根据需要随时对所需材料进行摄影记录。 仪 器 设 备 （二）小型用品 1．镊子类(forceps) 常应用医疗上的镊子。 根据操作需要有各种类型 2．剪刀类(scissors) 可采用医疗五官科用的中型剪刀。主要用于切断茎段、叶片等。也可以用弯形剪刀，由于其头部弯曲，可以深入到瓶口中进行剪切。 仪器设备 3. 解剖刀: 切割较小材料和分离茎尖分生组织时，可用解剖刀。刀片要经常调换，使之保持锋利状态，否则切割时会造成挤压，引起周围细胞组织大量死亡，影响培养效果。 4. 解剖针: 解剖针可深入到培养瓶中，转移细胞或愈伤组织。也可用于分离微茎尖的幼叶，可以自制。 5. 接种盘: 仪 器 设 备 （三）玻 璃 器 皿 组培瓶（玻璃）---要求透光度好，能耐高压高温, 以试管、三角瓶、培 养皿等使用较多。 三角锥瓶--- 适