两面针对甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌“谱”-“效”关系的分析研究.pdfVIP

目 录 中文摘要 1 英文摘要 3 引 言 6 正 文 8 第一部分 两面针抑菌活性部位的筛选及该活性部位 HPLC 指纹图谱的构建 8 1 试验材料与试验样品 8 1.1 材料 8 1.2 细菌种类及来源 9 1.3 试剂 9 1.4 仪器 9 1.5 分析软件 10 2 两面针抑菌活性部位的筛选 10 2.1 两面针活性部位的初步筛选 10 2.2 两面针活性部位的确定 11 3 供试品制备方法的考察 11 3.1 提取方法的考察 11 3.2 溶剂用量、提取时间及提取次数的考察 13 3.3 供试品溶液制备方法的确定 16 4 色谱条件的选择 16 4.1 色谱柱的选择 16 4.2 检测波长的选择 18 4.3 流动相的选择 20 4.4 洗脱程序的选择 22 4.5 柱温的选择 24 4.6 空白试验 25 4.7 120min 试验 26 4.8 色谱条件的确定 26 5 两面针药材HPLC 指纹图谱方法学考察与建 26 5.1 不同产地两面针样品的制备及色谱图的绘制 27 5.2 对照品溶液的制备及色谱图的绘制 27 5.3 方法学考察 27 5.3.1 精密度试验 28 5.3.2 重复性试验 30 5.3.3 稳定性试验 32 6 指纹图谱的建立 35 6.1 两面针对照色谱图的检测及导出 35 6.2 利用《中药色谱指纹图谱相识度评价系统2004A 版》软件建立两面针 对照指纹图谱 35 6.2.1 两面针色谱图的导出及相似度的计算 35 6.2.2 两面针HPLC 指纹图谱共有模式的导出 39 6.2.3 共有指纹峰的标定 39 7 结果与讨论 40 第二部分 两面针抑菌活性的研究 43 1 试验材料与试验样品 43 1.1 材料 43 1.2 细菌种类及来源 43 1.3 试剂 44 1.4 仪器 44 2 纸片琼脂扩散法测定各产地的两面针药材对细菌的 抑制作用 45 2.1 制备含药纸片 45 2.2 营养琼脂的配制 45 2.3 生理盐水的配制 45 2.4 抑菌试验检测方法 45 2.5 两面针抑菌活性的测定 45 3 结果与讨论 47 第三部分 两面针抑菌活性“谱”- “效”关系学的 研究 48 1 试验材料与试验样品 48 1.1 材料 48 1.2 数据处理软件 48 1.3 验证材料 48 2 两面针 HPLC 量化指纹特征峰均化数据 48 3 两面针抑菌活性“谱”- “效”关系学的研究 52 3.1 两面针对甲型溶血性链球菌谱效方程的建立 52 3.2 两面针对乙型溶血性链球菌谱效方程的建立 53 3.3 两面针对肺炎链球菌谱效方程的建立 54 4 方程验证 56 4.1 两面针验证样品量化指纹特征数据的获取 56 4.2 两面针验证样品量化药效数据的获取 57 4.3 验证结果 58 4.3.1 两面针对甲型溶血性链球菌“谱”- “效”方程的验证 58 4.3.2 两面针对乙型溶血性链球菌“谱”- “效”方程的验证 59 4.3.3 两面针对肺炎链球菌“谱”- “效”方程的验证 60 5 讨论 61 第四部分 两面针中成分含量与药效关系的初步探讨63 1 试验材料与试验样品 63 2 两面针中氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱含量与 其药效关系的探讨 63 2.1 两面针中氯化两面针碱含量与药效关系的探讨 63 2.2 两面针中乙氧基白屈菜红碱含量与药效关系的探讨 65 2.3 两面针中氯化两面针碱含量占乙氧基白屈菜红碱含量的百分比与总 药效关系的探讨 67 3 结果分析 69 4 讨论与总结 69 第五部分 工作总结 70 附 录 71 参考文献 73 综 述 75 致 谢 84 攻读学位期间发表的学术论文目录 85 广西中医学院研究生学位论文作者声明 86 个 人 简 历 87 中 文 摘 要 目的：对两面针Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.药材进行甲型溶血性链 球菌、乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌抑制作用的研究，为两面针药效学 研究提供试验依据。建立两面针抑菌活性部位的HPLC 指纹图谱，为科学 评价和有效控制两面针的质量以及建立两面针规范化生产基地提供实验 依据。对两面针药材进行甲型溶血性