哈密瓜采后病原的生长特性及致病机理初步研究.pdfVIP

StudyonthegrowthcharacteristicofHamimelonpostharvestpathogen anditsPreliminarystudypathogenesis ADissertationSubmittedto ShiheziUniversity InPartialFulfillmentoftheRequirements fortheDegreeof MasterofAgriculture By LiuTao (ProcessingandStorageofFruits) DissertationSupervisor:ProfTongjun-mao Shanchun-hui June,2014 万方数据 万方数据 II 万方数据 中文摘要 哈密瓜在采后贮藏期间的侵染性病原菌主要包括青霉属(Penicillium)、毛霉属 （Mucor）、镰孢属 (Fusarium)、链格孢属(Alternaria)和曲霉科曲霉属 （Aspergillus）。采后哈密瓜的腐烂问题一直是制约 新疆哈密瓜产业快速发展的最大瓶颈，病原菌的侵染是哈密瓜在采后贮藏期间腐烂变质的主要原因。 病原真菌在侵染采后哈密瓜的过程中会产生不同种类的细胞壁降解酶，细胞壁降解酶是导致采后哈 密瓜在贮藏过程中腐烂变质的重要因素。细胞壁降解酶的产生与哈密瓜的腐烂变质存在着非常密切 的关系。病原菌侵染寄主细胞后，寄主自身也会发生不同程度的生理生化变化，能够深入了解这些 变化在寄主细胞抗病防卫反应中的重要作用，为研究哈密瓜的抗病防卫机制提供重要的理论依据。 本试验分离筛选出引起采后哈密瓜腐烂变质的5株主要病原菌，分别命名为BJ-Q、BJ-M、BJ-M1、 BJ-M2、BJ-M3。将引起采后哈密瓜腐烂变质的主要病原菌在培养基中进行离体培养，在培养过程中 对病原菌产生的细胞壁降解酶活性进行研究，通过正交实验筛选出一组优势细胞壁降解酶种类，该 酶在哈密瓜的发病机制中可能起着非常重要的作用。并对主要的病原菌进行抗性酶活性研究及对侵 染后的哈密瓜组织进行电镜切片观察。试验结果如下： 1、通过对病原真菌进行生理生化特性研究、菌落形态分析及基因序列的同源性比对，试验结果 表明，BJ-M属于链格孢属；BJ-M1菌株属于镰孢属；BJ-M2菌株属于毛霉属；BJ-M3病原菌属于曲 霉属；BJ-Q菌株属于青霉属。 2、马铃薯培养基有利于青霉和链格孢霉的生长，而种子培养基有利于毛霉菌的生长；青霉、链 格孢霉对硝酸钠和乳糖的利用率较好，而毛霉对蔗糖和蛋白胨的利用率较高；三种哈密瓜主要病原 菌在中性偏碱性的环境中菌丝体生长较快，有利于病原菌的生长。 3、青霉和链格孢霉病原菌在离体培养的条件下均可以产生Cx、PMG、PG、β-葡萄糖苷酶、PGTE 和PMTE等细胞壁降解酶，产PMTE和PGTE两种酶活性均较低。 4、通过正交试验进行产酶条件的优化，结果表明，青霉病原菌产Cx 的最佳优化条件为：培养 基起始pH为6.5、培养时间为4d、氮源浓度为1.0%、碳源浓度为 1.5%，此条件下Cx 的酶活性达 到最大值为358.12U/mg；链格孢霉病原菌产Cx 的最佳优化条件为：培养基起始pH值为6.0、培养 时间为4d、氮源浓度为