MSCs联合G-CSF对兔梗死心肌修复作用的MR和病理对照的研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 本实验采用超顺磁性氧化铁(SPIO)标记兔骨髓问充质干细胞(MSCs)，旨 在明确多聚赖氨酸(PLL)介导SPIO标记干细胞的安全性及其对细胞的生物学 活性影响；通过MR动态观察移植标记干细胞的存活、分布范围及迁徙的情况； Cine—MR评价兔心肌梗死后心功能及治疗后心功能变化情况；病理观察干细胞 的存活及分布特点；结合免疫组化CD34、VEGF的表达以及凋亡细胞的分布及 计数，探讨MSCs移植及G．CSF注射对梗死心肌的修复作用，探寻兔心肌梗死 MSCs移植治疗更有效的移植时机及配伍，为临床干细胞移植治疗心肌缺血性疾 病提供实验依据。 方法： 采用全骨髓贴壁法对MSCs进行分离、培养；光镜观察细胞生长特征并记录 其生长曲线；通过流式细胞仪对所获得的细胞进行表面抗原(CD34和CD44) 的检测。采用PLL介导SPIO标记干细胞；对标记细胞进行普鲁士蓝染色，观察 标记效率；台盼兰染色观察细胞的活力；M1vr法观察干细胞增殖活性。兔左冠 状动脉前降支(LAD)低位双重结扎制备兔心肌梗死模型，于梗死后3天或7 天行MSCs移植和／或粒细胞集落刺激因子(G—CSF)注射。MR动态观察移植干