厚荚相思离体培及农杆菌介导遗传转化技术的研究.pdfVIP

厚荚相思离体培养及农杆菌介导 遗传转化技术的研究 摘要 本论文研究主要从继代增殖、愈伤组织的诱导和分化和无菌苗的生根 壮苗及移栽三个方面对厚荚相思的离体培养体系进行研究，建立起较好的 厚荚相思离体再生体系；从浸染时问、预培养时间和共培养时间对厚荚相 思农杆菌介导遗传转化的影响进行了的研究，初步建立了厚荚相思的农杆 菌介导遗传转化体系，为今后的厚荚相思离体培养与遗传转化研究提供重 要的参考依据。试验结果表明： 0．5 mg·L-1+KTl．0 mg·r为适宜的继代增殖培养基，它能够使无菌苗在以 较高的倍数增殖的同时保持旺盛的生长势，无菌苗的增殖倍数达3。4倍。 2、2，4-D能有效地对厚荚相思不同的外植体部位诱导出愈伤组织，最 高诱导率达100％；但诱导出的愈伤组织不能诱导分化形成不定芽。 3、6一队能有效地对厚荚相思不同的外植体部位诱导出愈伤组织，也能 直接在外植体上诱导分化出不定芽。最适宜的不定芽诱导培养基为改良 同。最高的分化率为羽状复叶在此培养基上的直接分化，分化率为55．86％。 4、NAA、I M、I队和ABT对厚荚相思无菌苗的生根均有较好的促进作 用，MET不适合用于厚荚相思无菌苗的生根诱导。 5、以不同的激素种类及其组合诱导生根所得组培生根苗的移栽成活率 不同。以ABTO．5-2．0mg·L-1+METO．5mg·L-1诱导生根的组培苗，在黄泥基 质进行移栽的成活率最高，成活率达86．39％。 6、不同的移栽基质对生根苗的移栽成活率有不同的影响。以黄泥：育 苗介质(1：1)进行移栽时移栽苗的成活率较高，成活率为84．36％。 7、厚荚相思外植体对Km的有较高的基础抗性，抗性浓度为100～125 mg·L-。。 8、头孢噻肟钠浓度为300 和A208SE的生长，但外植体保持较高的分化率。 9、不同的菌株、菌液浓度、浸染时间、预培养和共培养对厚荚相思遗 传转化GUS基因瞬时表达有不同的影响。 关键词：厚荚相思离体培养农杆菌介导遗传转化GUS基因 WTROAND STUDIES0NTHECULTURE／N l ATED l 0NOFA厶4口，月 月6：品口15汨口7aP，￡伪卜MED TRANSFORMAT ABSTRACT Inthis studiedculture，invgtroofAcacia fromthree paper，we crassica口pa and of inductionanddifferent— aspects：subculturepropagateaseptic：callus rootinductionandsound and iation： plantletsplantlets Studiedthe transformationofAcacia from agrobacterium-mediated crassicampa asthefollow：effectsofinfectiontimeand andco-culturetime pre—culture on transfrormation．Theofinvitroculture genetic system regenerationsystem and