myb类基因pp1转化百合的研究.pdfVIP

摘 要 百合是世界三大鳞茎类花卉之一，其花姿雅致，花茎挺拔，是点缀庭园、盆栽 与切花的名贵花卉。但是现在市面上的百合品种花色仍然比较单一，主要为白色和 粉红色，严重影响其观赏观赏价值，所以本研究的目的主要集中在百合花色的改良 上，希望培育出紫色百合新品种来满足人们高品质生活的需要。 序列与报道的序列相比具有99．7％的核苷酸同源性。经Spidey软件分析，以PJ包 括两个内含子，三个外显子，含有一个完整的阅读框，编码248个氨基酸；经Pr妇所 件分析表明尉尸J有MⅦ转录因子典型的DNA结合区域，说明刚P．f克隆正确。 本实验室已经成功克隆拟南芥花特异表达启动子PCHS，并构建好瞬时表达载 P!APl．冻 体pPCHS，将剧尸J替代pPCHS上的G【靥基因构建植物表达载体pPCHS 融法将pPCHSPAPl转化农杆菌，采用本实验室独创的两步外植体法将目的片段转 化麝香百合。农杆菌侵染时，用附加250mg／LAS的MS液体重悬菌体可以提高转 6-BA+O．1 化效率；侵染过的外植体在Ms+1．Omg／L mg几N从+250mg／Lcefo+50m{；／L IBA．+250 G418的固体培养基上分化旺盛：抗性芽在l／2MS+O．25mg／Lmg／LCefo +50 G418的固体培养基上诱导生根。本实验共获得了115棵抗性植株，随机 mg／L 阳性对照片段大小一致，随机抽取3棵PCR扩增阳性植株进一步作Sou也em检测， 其中2棵有杂交信号，证明目的片段已经整合到部分百合基因组中。 转基因植株的获得，将为以后利用花特异表达启动子、花特异转录因子和花色 基因转化百合以及其它名贵花卉提供科学依据，为培育花卉新品种、改良花卉品质、 提高花卉观赏价值，打下良好的基础。 关键词： 刚P』克隆百合遗传转化 Abs仃act isor圮oftlle bulb is nowe墙，wKch Lily n11优iInponant popul盯for蓼acemlposture 孤1d oneoftlle船re is驯眈lblefor s协ongscape．As omamentm，it intcrspersiI培nlegardcn and丘．esh tllecolorof ho、张Veris cuttingflowe璐．NowadaysLily comparativelysingleness， are、^粗te Vah圯．111llsthis and a侬娥itscommerCial on mosuy pirlkⅥ舡ch mlI蚵foc哪ed me of now口’scolor irnpr0Vement lily bygerIeticeIlgiIleefiI坞tecllIlique． hadbeen MYB仃觚scri埘on触0r以PJ DNA tothe accordingsequeme llad soft，以尸J 99．7％homolog谢血thatr印or“沮inNCBI．乒删dyzedbySpidey includedtwo introns，thre