浒苔多糖酶解产的分离纯化及活性研究.pdfVIP

浒苔多糖酶解产物的分离纯化及活-性研究 摘要 浒苔是我国东南沿海的一种人型经济性绿藻，本身可以食用，并 含有多种活性物质。据文献报道，浒苔多糖具有提高哺乳动物免疫力、 降血脂、消炎抗菌以及抗衰老等生理功能。但是，环境的改变会引起 浒苔爆发性繁殖并产生绿潮，一般都是将其掩埋，没有从根本上解决 问题。因此，对浒苔多糖进行研究不仅可以提高浒苔利用率，还能为 浒苔深加工成功能性食品奠定基础。本文以浒苔为原料，用酶法对浒 苔水提多糖进行水解，对酶解多糖进行抗氧化活性研究，并对活性最 佳组分进行分离纯化，将所得到的均一多糖进行结构和活性的初步研 究，为浒苔多糖和酶解多糖的开发与利用提供实验基础。主要的研究 结果如下： 1．对糖化酶、果胶酶、纤维素酶、C【一淀粉酶、脂肪酶5种酶的筛 选结果表明，糖化酶和果胶酶能有效催化浒苔水提多糖的水解。采用 响应面方法优化酶解条件，得出糖化酶酶解多糖的最优酶解工艺是糖 化酶酶浓度为14．20 U／mL，反应温度为48．70。C，pH为4．48，在此条件 下水解5h，实际测得多糖酶解率为12．65％；得出果胶酶酶解多糖的 最优酶解工艺是果胶酶加酶量为多糖的7．80％，pH为4．45，反应温度 为55．56。C，在此条件下水解5h，实际测得多糖酶解率为12．71％。 h、1h、2h、3h、4 2．将浒苔多糖用糖化酶和果胶酶分别酶解0 h和5 h，发现酶解多糖对三种自由基(DPPH、·OH、·Oz-)的清除效 果均优于未酶解多糖；而果胶酶酶解多糖对这三种自由基的清除率均 好于糖化酶酶解多糖；并且果胶酶酶解3h的浒苔多糖的清除效果为 最佳，其在5 l％，并将该多糖组分命名为EPCE。凝 为44．68％，．02‘清除率为78．3 木糖组成，还含有少量的甘露糖、葡萄糖和半乳糖，且各单糖的摩尔 百分比分别为71．72％：10．6％：6．33％：8．85％：2．5％。 G．100对EPCE进行进一步 3．采用纤维素DEAE一52和Sephadex 分离纯化，洗脱出一个中性多糖组分EPCEl和两个酸性多糖组分 白质等杂质，而EPCE3在280 nin处有很低吸收峰，说明此多糖可能 三者的峰型为单一峰，说明三者为均一组分。另外，体外抗氧化活性 研究表明，酸性多糖EPCE2的抗氧化活性最佳，当其浓度为l mg／mL 78．82％。 时，对DPPH、·OH和·02。的清除率分别为46．22％、10．16％并D EPCE2的理化分析表明其不含氨基酸、蛋白质和淀粉，多糖含量为 GC．MS表明多糖EPCE2主要是由葡萄糖组成，还含有少量的甘露糖、 木糖和半乳糖，其相应的摩尔百分比为70．74％：16．89％：10．23％： 214％。 关键词：浒苔；酶解多糖；抗氧化活性；分离纯化；结构分析 ISOLATION．PURIFICATIONANDACTIVITY EVALUATl0N0FENZYⅣ【ATICHYDROLYSATEOF ENTEROMORPHAPROLIFRA ABSTRACT isakindofeconomic Enteromorphaprolifra typemacroscopic inthesoutheastcoastof green China．Itcanbeedibleandcontains alga kindsofbioactive to inthe many