系统性红斑狼疮患者DNA甲基化相关基因表达的分析.pdfVIP

摘要 摘要 目的：系统性红斑狼疮(systemiclupus 明的累及全身多个系统的慢性进行性、反复发作和缓解的自身免疫性疾病，其 具体发病机制尚不得而知。DNA甲基化在基因表达的调控中具有重要的作用， 目前已证实SLE患者体内存在DNA甲基化状态的紊乱，主要表现为许多与免疫细 胞激活有关的粘附分子、细胞因子等基因启动子区的低甲基化。理论上，包括 DNA甲基转移酶(DNA demethylase，主要为mbd2)和甲基化结合蛋白(methyl—CpGbindingprotein，MBP， 其中以MeCP2为最重要)等在内的DNA甲基化相关基因可以共同影响DNA甲基 化状态以及SLE相关基因的表达与活性，但迄今为止尚缺乏有关的研究证据。本 blood mononuclearcells，PBMC)中的表达水平及它们之间的相关性，分析了各基因 表达与SLE疾病严重程度之间的关系。同时，我们检狈JJSLE相关基因淋巴细胞功 function．associated1，LFA．1)亚基CDlla在 能相关抗原．1(1ymphocyte antigen SLE患者PBMC中的表达水平，并将其作为间接反映基因甲基化程度高低的指 标，分析DNA甲基化相关基因的表达对DNA甲基化状态的影响，探讨它们在SLE 发病中的作用，希望进一步阐明SLE的发病机制，并为该病的防治提供新的思路。 材料与方法：根据1997年美国风湿协会修订的SLE的诊断标准收集34例 SLE的患者，并根据系统性红斑狼疮疾病活动指数(systemiclupuserythematosus disease activity 正常对照组17例。分离获得患者外周血单核细胞并提取总RNA。以RT-PCR 的表达情况。采用两样本均数差别的，检验分别比较对照组、SLE缓解期与活 动期患者PBMC中各基因表达有无差异，以相关分析等统计学方法研究各基因 之间以及分别与SLEDAI评分之间的关系。 摘要 P=0．0001)。 (5)对照组、SLE缓解期及活动期患者MeCP2表达两两之间无 明显差异。(6)SLE缓解期患者PBMC中CDlla表达明显高于对照组(，=5．35， P=0．0001)；SLE活动期患者PBMC中CDlla表达明显高于对照组(，=6．57， P=0．0001)；SLE活动期患者PBMC中CDlla表达明显高于SLE缓解期(户2．99， P=0．0061)。 相关(FO．550，P=-0．0222)，其余两两表达之间都无相关性。(8)34例SLE 患者(包括缓解期及活动期)PBMC中，CDlla的表达与mbd2的表达成正相 关(厂=0．392，P=-0．0218)，其余两两表达之间均无相关性。(9)34例SLE患 者(包括缓解期与活动期)PBMC中，CDlla的表达与SLEDAI评分成正相关 P=0．0001)。其余基因表达与SLEDAI评分无相关性。 1表达的降低以及去甲基化酶mbd2表达的增高。两者可能单独或在一定程度上 相互配合导致了DNA甲基化程度的降低，进一步引起SLE相关基因的过度表 不起作用。(3)MeCP2和mbd2在正常情况下维持甲基化作用和去甲基化作用 可能是相互制约的，而在SLE患者中这种制约关系可能被破坏。 关键词：系统性红斑狼疮，甲基化相关基因，CDlla，RT-PCR H Abstract ABSTRACT a andrecurrent objectives：Systemiclupuserythematosus(SLE)isprogressive autoimmunedisease ofhuman indicatesthat