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水消毒副产物三甲烷及金属离子与蛋白质的作用研究.pdf
摘 要
氯甲烷为研究对象,采用荧光光谱分析法,研究三氯甲烷与生物大分子
一蛋白质(牛血清白蛋白、人血丙种球蛋白)的相互作用,探讨了三氯甲
烷引起牛血清白蛋白、人血丙种球蛋白的荧光猝灭机制,并测定了三氯
甲烷和这两种蛋白质的结合常数和结合位点数。由于蛋白质的天然荧光
度之比为i00:9:0.5),因此本文还研究了三氯甲烷对色氨酸和酪氨酸
的荧光猝灭作用。结果表明,三氯甲烷对牛血清白蛋白的荧光猝灭为静
态猝灭,而对人血丙种球蛋白和色氨酸的荧光猝灭可能为静态猝灭,但
还需进一步研究。通过测定三氯甲烷与两种蛋白质的结合常数表明,三
氯甲烷与牛血清白蛋白的结合常数远大于与人血丙种球蛋白的结合常
数,可能由于这两种蛋白质结构不同所致。
为进一步认识水中或血液中金属离子存在对三氯甲烷与蛋白质相互
作用的影响,本文还研究了铜离子(Cu”)、铁离子(Fe“)和牛血清白蛋白、
人血丙种球蛋白以及色氨酸的相互作用。结果证实了铜离子和牛血清白
蛋白至少存在两类结合部位,第一类结合部位不是直接和蛋白质中色氨
酸(Trp)直接作用的,且第一类结合部位的结合常数小于第二类的。第二
类结合部位与铁相似,是直接与蛋白质中色氨酸残基作用的。通过计算
金属离子一蛋白质以及金属离子一色氨酸的结合常数,结果表明,铜离子
与这两种蛋白质的结合常数小于铁离子,而色氨酸正好相反,铜离子与
色氨酸的结合常数大于铁离子。
在分别研究了三氯甲烷、金属离子与蛋白质二元作用的基础上,本
文还测定了金属离子一蛋白质一三氯甲烷的三元作用。结果表明,金属
离子使得三氯甲烷和牛血清白蛋白的结合常数略有降低,但随金属离子
浓度增加很快达到平衡,结合常数不再变化,说明三氯甲烷可以被牛血
清白蛋白储存和运输而受金属离子影响较小。而对人血丙种球蛋白而言,
金属离子会完全竞争三氯甲烷和人血丙种球蛋白结合,使得三氯甲烷与
人血丙种球蛋白解离。此外,本文还讨论了三氯甲烷对金属离子和蛋白
水消毒副产物三氯甲烷、金属离子与蛋白质的作用研究
质作用的影响,结果表明,随三氯甲烷浓度的增大,金属离子和牛血清
白蛋白的结合常数降低,特别是三氯甲烷对低浓度金属离子与牛血清白
蛋白的结合影响显著。相反,三氯甲烷对金属离子与人血丙种球蛋白的
结合影响较小,这也证明了三氯甲烷与人血丙种球蛋白作用较弱。
关键词:三氯甲烷;牛血清白蛋白;人血丙种球蛋白;金属离子;荧光
光谱
英文摘要
ABSTRACT
The Interactionbetween and
serum
bio—macromolecules--proteins,bovine
theinteractionbetweenand
humanum(GSH),and CHCl3
seroglobulinum
studied fluorescence
Tryptophan(Trp)andTyrosine(Tyr)wereusing
inthis resultsshowedthatthe
spectroscopypaper.Theexperimental
induced
fluorescenceofBSA followsstatic
quenching byCHCl3 quenching
the ofGSHand induced
fluorescence
procedure,and quenching Trp by
followstat
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