生化药物的毛细电泳分离与富集.pdfVIP

西南大学硕士论文 论文摘要 生化药物的毛细管电泳分离与富集 环境科学专业硕士研究生 闫征 指导教师黄承志教授 摘 要 药物滥用给人类健康和生态平衡带来的危害不象其它环境污染那样直观，它的隐形性使 得人们一度无视它对健康的严重威胁以及对环境的潜在污染。因此，建立简单快速有效的分 析方法对药物进行监控是十分必要的。基于环境样品的复杂性考虑，本文选用毛细管电泳这 一高效快速的分离技术进行生化药物的分析。本论文的研究工作包括两方面。一方面为抗生 素类药物的毛细管电泳分离分析，另一方面为生物大分子的毛细管电泳在线富集方法的探 究。 为此，本文在简介毛细管电泳原理的基础上，论述了分离模式，检测方法，在线富集技 术及其在生化药物分析中的研究进展。并讨论了贯穿于本文每个研究章节的重要物质——表 面活性剂在毛细管电泳中的应用。内容如下： (1)抗生素类药物的毛细管胶束电动色谱的分离分析。 由抗生素滥用带来的环境问题已不容忽视。因此，建立行之有效的抗生素的分析检测方 法迫在眉睫。采用毛细管胶束电动色谱分离模式，通过优化分离条件，可同时实现对阿莫西 林，氯唑西林，头孢氨苄，头孢噻肟，头孢唑林五种抗生素的检测。仅需9分钟的分析时间， 简单快速，行之有效。将该方法应用于合成尿样中抗生索的分析，日问和日内的RsDs分别 为1．31—6．07％和0 66．7．65％，回收率为90·‰1lo％。该方法同样应用于商品化药物的分析检 分别为O47-11 l％和O．032．O．295％。此外，本文还对分离条件对抗生素的迁移行为的影响做 了理论探讨。 西南大学硕士论文 论文摘要 (2)生物大分子的毛细管电泳在线富集方法的探讨。 将几种常见的毛细管电泳在线堆积技术，简单场放大样品堆积，增强场放大样品堆积， 整管进样．以及在此技术之上发展起来的扫拂富集技术应用于胰岛素的分析中，可以获得胰 岛索检测信号的增强，在不同的优化条件下，它们的富集效率可达到1．5—101倍。但是，由 于胰岛素分子的性质决定，相对于其他小分子物质的富集效果而言，不能获得很高的富集效 率。如何增大胰岛素分子的表面电荷．以及如何使胰岛素分子结构更为紧凑利于聚集，便成 为提高其富集效率的关键因素。新提出的扫拂富集技术操作简单，并可获得与整管进样接近 的富集效率，有望成为一种具有发展潜力的在线样品富集技术。 鉴于目前DNA在线富集技术的开发和应用相对较少，建立在线富集技术对DlqA进行 分析又是十分必需的。本文在大体积进样的基础之上，利用阳离子表面活性剂对D1qA分子 的聚集作用，运用改进后的扫拂聚焦富集技术，对20个碱基以下的短链DNA及长链fsDNA 进行富集。富集效率可达到15-30倍。当在缓冲溶液中添加经过处理后的酸性碳纳米管，在 不影响富集效率的同时，可以完成几个碱基链的分离。以6A，15T及fsDNA为分析样品考 察该富集技术的重现性及线性，能够达到允许的范围。 关键词：毛细管胶束电动色谱毛细管在线富集技术抗生素胰岛紊核酸 堕壹查兰堡主堡茎 一j笪!：i!里 on—Line of and Separation inBiomedical Electrophoresis Capillary Pharmaceutical and Analysis Master YAN Science