裂褶菌F17对料脱色的研究及偶氮染料刚果红降解产物的分析.pdfVIP

摘要 摘要 全世界每年大约生产8×105吨的染料，其中80％是偶氮染料，10～15％的染 料在生产和使用过程中被释放到环境中，造成严重的环境污染。白腐真菌依靠在 次生代谢阶段产生的细胞外酶对多种难降解的有机污染物具有广普的降解能力， 包括多种染料。自腐真菌对染料废水脱色方面的研究已经得到广泛的重视。 本实验室选育的一株自腐真菌一一裂褶菌F17可脱色降解多种不同结构的 染料，具有很好的应用前景。本文研究了裂褶菌F17的生长特性及其对染料的脱 色能力；研究了培养温度、初始pH、染料加入时间、染料初始浓度、诱导剂、 天然物质、金属离子、抑制剂对染料脱色率的影响；新构建了一脱色降解体系， 并在非灭菌条件下，研究了裂褶菌F17对染料的脱色降解能力；此外，分离并鉴 定了偶氮染料刚果红的降解产物，初步推测了其可能的降解途径。实验结果如下： l、裂褶菌F17在马铃薯综合固体培养基中的生长速度明显快于限氮和麦芽汁 固体培养基，最佳生长温度为28oc，生长pH范围在4．5～8．0之间；黄孢原毛 平革菌和变色栓菌的最佳生长温度分别为370c和28。c，生长pH范围均在4．5～ 6．0之间。 2、裂褶菌F17、黄孢原毛平革菌和交色栓菌对染料刚果红都有一定的脱色 oc、染料初始浓度100 能力。温度28 mg·L’1时，在限氮培养基中，脱色72小时 后脱色率分别为66．996、82．1％和81．9％。 3、裂褶菌F17对染料刚果红脱色的最佳条件：温度28oc、初始pH值为4．5以 及菌体摇瓶培养3天加入染料，刚果红初始浓度以100mg·r为宜，诱导因子藜芦 醇、吐温80、土豆汁、松木屑的加入明显提高了刚果红的脱色率，其最佳终浓度 mmol·L2、0，1％、50 分别为1．0 g·L一、3．0gL一，刚果红的最高脱色率在72d,时 后达到97．锚，而叠氮化钠和氰化钾的加入对刚果红的脱色有显著的抑制作用。 4、裂褶菌F17在染料脱色体系中的最佳产酶条件：温度28oc、初始pH值为4．5 以及菌体摇瓶培养3天加入染料，刚果红初始浓度以100 mg·L1为宜。另外，菌体 产酶以MnP为主，最高酶活达到103．4 UL～，LiP活力很小，未检测到Lac。刚果 红的脱色率与累积MnP酶活具有良好的线性关系，相关系数为0．973。 5、新构建了一脱色降解体系：0．1 mol·U‘乳酸一乳酸钠缓冲液(pH：4．O) 100ⅢL·f1，染料100 mg·L一，松木屑3．0g·L一，湿菌球约70．0 g-L一。裂褶菌 摘要 F17在此体系中对不同结构染科均表现出一定的脱色降解能力，其中刚果红和茜 素红在脱色120小时后脱色率达90％以上，降解率达8096以上。在非灭菌条件下， 裂褶菌F17在新构建的体系中也对染料表现出较高的脱色降解能力，脱色120 小时后刚果红的脱色率达89．7％，降解率达78．6％。 6、在新构建的体系中，裂褶菌F17对偶氮染料刚果红表现出较高的脱色能 力，脱色192小时后刚果红脱色率为95．1％，而吸附率只有6．7％，表明染料的脱 色主要是降解作用。对脱色96小时和192小时后的脱色液进行紫外一可见扫描， 发现刚果红在可见光区495nIn处的吸收峰已消失，并在紫外区出现多个吸收峰。 通过高效液相色谱分离得到一种刚果红降解产物，用质谱和傅立叶红外光谱鉴 定，发现该产物分子量为184．2。主要官能团为—C6H|一和芳基—N也，结合刚果 红结构和该产物的核磁共振波谱推测其为联苯胺，并且随着时间的延长，联苯胺 逐渐被降解。 关键词：裂褶菌F17；脱色条件；MnP和LiP；脱色降解体系；产物分析 II