Bt转基因结球蓝的遗传分析和检测.pdfVIP

摘 要 olerecea 结球甘蓝(Brassica 达几十万公顷。生产上结球甘蓝虫害发生相当严重，造成了产量和品质的损失。为 害结球甘蓝的主要害虫是鳞翅目的昆虫，其中主要包括菜粉蝶和小菜蛾等。 由于在已有的种质资源中很难找到可用的抗虫材料这使得蔬菜常规抗虫育种 受到了限制。利用基因工程技术手段培育抗虫蔬菜新品种是农业发展的一个重要方 向。基因工程技术不仅安全有效而且投资少、见效快、特异性杀灭害虫和不污染环 境。植物基因工程为抗性育种提供了一条有效的方法。人们已从细菌中分离得到苏 目昆虫具有特异的毒杀作用而对高等动物和人无害。因此，将占f基因转入结球甘 蓝而获得抗虫材料而成为可能。 本研究内容主要涉及转化获得转基因甘蓝，对已获得的卡那霉素抗性植株的分 子检测，转化植株的抗虫鉴定，同时对外源基因在转化植株自交后代的遗传分离情 况进行了研究。取得的主要研究结果如下： l 下胚轴绿芽的再生，使其不能分化出芽或分化出白色或紫色芽。 抑制作用。随着头孢霉素浓度的增加，抑制作用加剧。 3共培养时间影响结球甘蓝转化频率，本实验中共培养48h得到的抗性芽较 多。 4转化获得“牛心”结球甘蓝植株。经PCR检测，证明占f基因已经整合到结 球甘蓝基因组中。 分析，证明日f基因己经整合到结球甘蓝基因组中。 6 “中甘八号”中经Southern杂交检测的阳性植株，在蕾期进行自交，收获 T．代种子。对T。世代植株进行苗期卡那霉素涂抹叶片和PCR扩增分析鉴定，发现曰f 基因和NPTII基因在植株体内遗传符合显性单基因孟德尔遗传规律。 7分别对“中甘八号”转化的L、T，代植株进行室内抗虫鉴定，发现占}转 基因植株的抗虫性均得到提高，但不同植株之间存在一定差异。 关键词：口}基因；转基因甘蓝；遗传分析：抗虫性 ABSTRACT oleracea an with Cabbage(Brassica inChina var．capitata)isimportant vegetable area toseveralhundredthousandshectares．Pestslossesin plantingup cause heavy cabbage ofthem larva(pieris productions．Amongcabbageworm rapaeL．)and diamondbackmoth xylostellamostsevere larva(PlutellaL．)are pests． sources Seldom ofresistancehavebeen limitedthe of found，which progressregular oninsect resistance．Genetic breeding engineeringtechniquesprovidepotentialapproach fortransfersuchasBt insect are geneofferingprotectionsagainstpests．Thesetechniques safeand itcan reducethecostof very