两种典型手性农内分泌干扰效应的对映体选择性研究.pdf

摘要 农业生产、家居生活中手性农药的广泛使用，使其不可避免地进入到环境 系统、野生动植物以及人体中。手性农药的各对映体在生物过程中存在着较大 的差异性，故表现出不同的生态毒性。手性农药的使用与环境安全已成为一个 全球关注的新问题。 目前环境领域关于手性农药的研究，大多集中于环境命运、急性水生毒性 等方面的对映体选择性，但在内分泌干扰方面的研究，少之又少。因此，我们 选取两种比较典型的手性农药——持久性有机污染物的重要成员o,p’．DDT及一 种目前广泛使用的拟除虫菊酯杀虫剂联苯菊酯(bifenthrin)为对象，在不同的 体内和体外模型中研究了它们类雌激素效应的对映体选择性差异。在此基础上， 进一步对D，p7．DDT内分泌干扰效应的对映体选择性差异所造成的对人乳腺肿瘤 和人类胎盘发生过程的影响的对映体选择性进行了研究，以探讨手性化合物的 内分泌干扰效应可能导致的对人类健康影响的对映体选择性差异及其机理。 在将这两种手性农药成功拆分得到对映体纯样品的基础上，我们主要研究 了以下四部分内容： (1)选用雌激素依赖型的人乳腺癌MCF．7细胞系为研究模型，采用MCF．7细 7-DDT较 了o,p’一DDT雌激素效应的对映体选择性。研究结果显示：R-(_)-o,p 孓(+)-o，p 基因表达等方面的效应均高于．孓(+)一o,p7DDT。我们的研究结果表明，o,p’-DDT r-DDT的雌激素活性远高于 的类雌激素效应具有明显的对映体选择性，尺．(_)．o,p 的信号通路有关。 (2)已有研究表明环境雌激素类化合物与乳腺癌的发生、发展有一定的正 7．DDT类雌 相关性，而D妒’．DDT是一种典型的环境雌激素物质。在评价了o,p 激素效应的对映体选择性的基础上，我们首次对o,p’．DDT对乳腺肿瘤影响的对 映体选择性进行了研究。在人乳腺癌MCF．7细胞系体外模型中，通过细胞间黏 附分析实验、qRT-PCR检测与乳腺肿瘤侵润、黏附、增殖相关的MMP．9、MMP．2、 来初步探索o,p’．DDT影响乳腺肿瘤发展的对映体选择性及其机理。研究结果显 r-DDT能促进乳腺癌细胞MCF一7的侵润能力，而这种作用与MMP．9、 示：o，p MMP．2分子表达的上调和细胞阚黏附性降低有关。同对灭．㈠．o,p’一DDT对细胞 侵润的促进效应高于璺(+)．D，p’DDT。此外，细胞增殖的加快是肿瘤发展的一个 7．DDT的外消旋体及其对映体皆能够上调端粒酶 明显特征，我们的结果显示o,p 尽(+)．D∥’．DDT，这是D妒’．DDT对映体对乳腺癌细胞增殖影响的可能机理之一。 结合我们前面的研究结果，我们认为o,p’一DDT雌激素效应的对映体选择性差异， 可能是造成o,p’-DDT对藐腺癌影响具有选择性的一个主要原霞。 (3)人类胎盘发生过程是正常妊娠的重要生理保障。而胎盘的发生是一个 受多种激素及其它因素精细调节的过程。目前关于环境雌激素是否能够干扰这 一过程的研究非常有限。我们泼人绒毛膜癌JEG-3细施系为研究模型，通过酶 环境污染物(激D炉’。DDT荑铡)对人类生殖健康影响的对映体选择性及机理。 结果照示：o,p’．DDT可以诱导绒毛膜癌细胞系JEG．3的孕酮激素分泌以及孕酮 受体表达、上调妊娠免疫分子HILA．G的表达，同时促进多肽类激素GnRH．I 等赡表达。泼上效应均表现窭一致的对映体选择性，帮R．㈠．049’-DDT对滋养 层细胞内分泌干扰的效应高于(+)．o,p’DDT。 应其有明显昀对映体选择性，焉且这种选择性在不同组织(人类乳腺、人类胎 盘)中显示出一致性，即心，㈠．o,p’．DDT的内分泌千扰效应总是高于 娶(+)．OnO’-DDT。因此，在研究手性化合物雌激素效应的对映体选择性的同时， 更要关注由此带来的健康风险评价中的一系列与人类健康栩关酶问题。 (4)迄今为止，关于内分泌干扰效应方面的对映体选择性的研究基本局限 于p妒’．DDT及其类似物。已有的研究结果显示，目前广泛使用的拟除虫菊酯类 杀虫刹，具有潜在的沟分泌干扰效应，但在对映体水平上尚