两歧双歧杆菌培及冻干保护剂的研究.pdf

两歧双歧杆菌培养及冻干保护剂的研究 摘要 菌，广泛应用于功能性食品中。目前益生茵菌粉主要从国外进口，其价格高， 且对国外的依赖性强，明显制约了我国益生菌产品的开发。本课题以两歧双 歧杆菌BB01为试验菌株，研究了该菌的培养基、补料方式、抗冷冻因子及 冻干保护剂等，确定了活菌数高的培养基组成及冻干存活率高的两歧双歧杆 菌复合冻干保护剂，获得了高活性的两歧双歧杆菌菌粉。 糖、麦芽糖及蔗糖)及益生元(低聚果糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖、低聚 半乳糖、水苏糖和菊糖)对两歧双歧杆菌生长的影响。结果表明乳糖、葡萄 糖，低聚果糖、低聚木糖，低聚半乳糖及菊糖对两歧双歧杆菌的生长有一定 促进作用，以乳糖、菊糖和低聚果糖为主要影响因素，经登高试验和中心复 合设计(Central Composite 为：乳糖1．6％，菊糖0．26％，低聚果糖0．22％。活菌数在优化后的培养基中 达到了(2．1 109cfu／mL。 7a：0．06)x 在复合碳源及益生元优化培养基的基础上，保持MRS无机氮源不变， 采用PB试验设计筛选蛋白胨、牛肉膏、酵母粉和酪蛋白水解物有机氮源主 因子，再经登高试验及CCD试验设计最终得到复合氮源为：蛋白胨O．9％， 酵母浸粉0．3％，牛肉膏O．7％。培养基优化后，发酵液中活菌数达到了 研究了补料时间和中和剂对两歧双歧杆菌生长的影响，结果表明在培养 山梨醇、甘露醇、谷氨酸、谷氨酸钠和甜菜碱等抗冷冻因子添加到MRS优 化培养基中对两歧双歧杆菌冻干的影响，获得两歧双歧杆菌抗冻因子为： NaCl 75．2士O．4％，较对照组提高了32．65％。 在MRS优化培养基基础上，采用响应面法对两歧双歧杆菌冻干保护剂 进行了分类优化。最终得到两歧双歧杆菌益生元类保护剂的最佳配比：低聚 组提高了15．33％；氨基酸及盐类保护剂最佳组合为：甘氨酸5．5％，精氨 酸4．5％， 较对照组提高了15．83％。 在前期试验结果基础上，将筛选得到的抗冻因子添加到培养基中，对试 验得到的保护剂因子和脱脂乳一并进行响应面优化，确定了复合冻干保护剂 cfu／g，且菌粉产量达到6．679／L。 研究得到的两歧双歧杆菌优化培养基，能有效提高培养液中的活菌数， 延长菌体生长周期；同时抗冷冻因子与复合冻干保护剂的配合使用，不仅降 低了冻干制备菌粉的成本、提高了菌粉产量，同时提高了菌粉活菌数及存活 率，为进一步工业化生产奠定了技术基础。 关键词：益生菌，两歧双歧杆菌，冷冻干燥，抗冷冻因子，冻干保护剂 n STUDYoNCUIjrIVATIONAND O墨BIFIDoBAcTERIUMBIFIDUM ABSTRACT iSakindof whichbenefttothe Bifidobacterium bacteriais physiological now usedinfunctionalfoods．Ⅵmfiethe body，itwidely probioticpowdermainly fromabroad and on countries now,its imported hi．ghprice dependenceforeign restrictedthe of inour greatly development probioticproducts study the factors