农杆菌介导的彩棉花遗传转化影响因素研究.pdf

摘荽 摘要 棉花足‘种重要的纤维作物和油料作物，棉纤维是已知纤维素纯度最高的天然资 源。随着人们生活水平的闩益提高和纺织工业的飞速发展，彩色棉花作为纯天然无污染 的绿色广：品在当今倍受青睐。但彩色棉花+‘直存在着纤维短、强度差、色谱狭窄及遗传 性状不稳定等诸多问题使彩棉的发展滞缓。基因工程的兴起及其在作物产量提高及品质 改良l：发挥的巨大作用表明，利用基因工程手段来改善棉花的纤维品质是一条可行的途 径。棉纤维发育相关摹因和调控元件的识别与分离为这条途径提供了前提。目前世界各 国对此研究领域都极为重视。可以预见彩色棉花纤维品质改良的基因工程前景心’美 好。而基冈工程进行的成功与否在很大程度上依赖于高效的转化体系的建立。很多制约 组培：l：作顺利进展的因素是实验中必须研究与克服的关键。 选，建澎起适。白：彩色棉花茎尖转化的高效体系，希望为彩色棉花纤维品质的分子改良I： 程提供良好的转基因受体系统和适。白：的转化方法。其研究结果如下： 载体用于植物转化。 附加不同浓度的激素KT进行培养，结果表明，棉花茎尖体系诱导成苗率与基因型没有 差异，均以MS+0．1mg／LKT为最适培养基。茎尖成苗途径不经过愈伤的诱导弓分化， 成茼快，周期短，不受基因型限制，是较好的植株再生体系。茎尖体系用做转化时，≯ 良好的转化受体系统。 测试。结果表明，筛选压力存在基因型的差异，绿色棉花比白色棉花对Kan更敏感， 压。 衡无8930为供试材料，测试不同浓度的菌液侵染后所得抗性绿苗率的差异。结果表明， 摘要 慈率普遍较赢。闻样条件下，绿色棉花的抗牲缘莆率要离予囱色棉花，签于绿色棉花对 抗，龟素受敏感，认为绿色棉花可能沈自色棉花曼荔予进行遗传转纯。 25为供试率孝褥，溺试不同苗龄的茎失外植体侵染后所得抗性绿苗率的差异。结采表明， 不同茁龄的棉花蓬尖桶律转亿，不存在基因型黻制，均雠3d苗龄的茎尖转化后，抗性 绿茵率簸高，阻盾随着苗瀚的增加抗褴绿菌率显著降低。 6以绿棉9804为供试材料，研究真空渗透处理对转化的影响，袭明真空处理不flji 可以很好的辑j制假阳性的发生，而茸．能够提高转化中的抗性茁率。迸一步的方游分析表 明，在棉花转化过程中，真空渗透处理存在时问上的差弊，抽真空到液面出现气泡后， 再保持5min的效果墩好，所得平均抗性绿茁率最高。过度的负压处理会对细胞造成很 大伤害。 7．抗性苗的壮荫生根培养与培养麟的成分密切相关。研究中发现，在抗性荫的筛选 培养基中添加活性炭与KT交脊使用，可以抑制酚类物质对抗性蔚的毒害作用，从而实 现壮茁。 本研究首次采用农杆菌真空渗透法将Expansin基凶转化彩色棉攀尖受体，建赢起 彩色棉花茎尖转化的高效体系，证明茎尖是良好的转化受体系统。本研究可为其他研 究肯提供参考。 关键词：彩色棉 组织培养 转化真空渗透 纤维基因工程Expansin Abstract for ontheinfluencefactorsoftransformation Study colourcottonvia tumefaciens Agrobacterium ShiFumei Sichuan Ya’all AgricultureUniversity Abstract Cottonisoneofthemost naturesourcesoffiberandoil．Withthe important focuson environ