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氨基转移酶基因eR基因）的克隆及在黄瓜中的遗传转化.pdf
氨基转移酶基因(eR基因)的克隆及在黄瓜中的遗传转化
摘 要
cubensis)引起的霜霉病是世界范围内的瓜类
由假古巴霜霉菌(Pseduoperonospora
作物的灾害性病害。黄瓜(CucumisstativusL)上尤为严重，无论是保护地还是露地条
件下栽培的黄瓜，发病普遍而且危害严重。利用DNA重组技术可使性状在种间转移，且
受体本身主要性状不被改变，突破了远缘杂交不亲合障碍，开辟了植物育种的新途径。
高黄瓜对霜霉病的抗性，获得有育种价值的黄瓜种质资源。
通过提高寄主酶促活性来提高抗病性的基因，被叫做酶促抗性基因(enzymatic
酶的两个基因，最近的研究表明将两个基因转化到感性甜瓜品系表现出对霜霉病高抗病
chain
PCR阳性植株。主要研
花粉管通道技术将其导入黄瓜优良自交系中。获得了转PPN．at2
究结果如下：
1．本实验重点进行了氨基转移酶基因(At2基因)的克隆及其表达载体的构建。根据甜
H．At2、1’．At2编码区基因片段，克隆到PGEM．T
easy载体中，经测序发现与已知的抗性
At2序列具有很高的同源性。
PNZIP的启动子之后，获得了工程菌株，并命名为PPN—at2。
3．利用花粉管通道技术对上述基因进行了黄瓜的遗传转化实验。将PPN-At2导入黄
瓜优良自交系中，在经卡那霉素(KN)抗性初步筛选基础上，对抗性苗进行TPCR技
术扩增，获得了5株转基因植株。其转化率在万分之二三左右。这种利用花粉管通道技
术转化率为黄瓜的遗传转化拓宽了转化途径。
关键词：黄瓜，eR基因，霜霉病，花粉管通道技术，遗传转化
Clone aminotransferasesandtransformationincucumber
ofplant genes
Abstract
causedthe cubemisisa foliar
mildew by Pseduoperonospomdevastating
Downy oomycetepathogen
diseaseofcucurbitsworldwide．Itbreaksdistant anddiscoveranewbreeded
hybridizationcompitable
this eR clonedfromcucumberandmelon，andforH-At2
way．1n paper,twoganes(H-AO，T巩t2genes)were
was weretransforredtocucumberin toreceivenew
clonedfiomcucumber order
ffistly．Tbe
genes
cucumbermaterials．GENBANKofH-At2、T-At2aleEF628204and of
breeding
H’．At2、T’-At281eEF628206andEF628207．
that conferan to infection
showunlikeother diseaseresistance resist
Here，we plant genes．w
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