番木瓜（Carca papaya L.）遗传多样性的RAPD标记及雄性性别的RAPD和SCAR标记研究.pdfVIP

摘要 番木瓜遗传多样性的RAPD标记及雄性性别的 RAPD和SCAR标记研究 果树学专业硕士研究生：任朝兴 指 导 教 师：李凌教授 黄建昌教授 摘 要 番木瓜(Carica L)原产美洲热带，是一种热带可E热带速生双子叶、多性别多年 papaya 生常绿果树，基因组较小(2n=18)，为我国南方名优水果，是岭南佳果之一。17世纪传入我 国，栽培历史已有300余年，在我国主要分布于广东、广西、福建、台湾、海南等省、自治 区。番木瓜营养丰富，含有铁、钙等多种微量元素及丰富的微生素A和C。具有保健作Hj：朱 熟果与半熟果及叶含有丰富的木瓜酵素。可助消化；番木瓜的所有绿色部分均含有一种器木 瓜碱，可供药用；番木瓜所含凝乳蛋白酶，广泛应用于食品jI：业、医药、制革、美容用品等； 番木瓜具有非常广泛的用途及经济价值，在国际市场上很受欢迎。通过育种手段获得优质、 高产番术瓜品种成为番木瓜产业的必要手段。 长期以来，我国番木瓜种质资源的研究滞后于育种实践，对多种类型的地方资源或生态 型在遗传上的差异及现有番木瓜品种的遗传多样性等缺乏足够的研究。国内对番术瓜的了解 主要局限于外部形态与农艺性状上，较少从细胞遗传及分子遗传水平对番木瓜现有种质和引 进种质进行研究，这些均导致番木瓜种质资源不能被有效利用，在杂交亲本选配上存在很大 的盲目性，影响了育种效率的提高。由于番木瓜各品种(系)大多采取产地和果实性状复合 命名的法则命名，因此，极有可能造成同物异名或是同名异物现象。番木瓜通常采用实生繁 殖，因而在育苗过程中会出现一些雄株，这不仅对生产造成浪费，而且在有雄株的果同留种 会使以后繁殖出的幼苗出现大量的雄株，只有在6～8个月后番术瓜进入开花结果期能从形态 上准确判断植株性别时才能将雄抹整株斩除。 本论文结合以上几方面问题，采用RAPD和SCAR标记技术，以17份番术瓜种质资源为研 究对象，对它们的遗传多样性进行分析，井开展性别早期鉴定的研究，为番术瓜遗传育种及 性别鉴定的分子生物学研究提供基础资料。主要结果如下： 两南大学硕十学侍论文 利用RAPD标记技术，从214个引物中筛选出能稳定扩增的16个引物，对17个番木瓜品 种(系)进行了扩增，共扩增出120条谱带，77条具有多态性，多态性比例占64．17％，平均 果，采用非加权成对平均数算法(UPGMA)对17个番木瓜品种(系)进行了聚类分析，结果表明， 其遗传距离在0．05～O．23之问，在0．17水平上可以分为4类。香妃和泰国红肉各为一类：钟村 3号、钟村l号、台农5号和夏蓝4个品种为一类；穗中红、红妃、红铃、日升、台农2号、 岭南种-GY、荚中红、新世纪、红蜜、香蜜等11个品种聚为第四大类。利用RAPD技术在鉴别 番术瓜品种及分析其种质资源遗传多样性切实可行。 利用RAPD和SCAR标记技术鉴定番木瓜雄性性别。在214个随机引物中，用引物Z18扩 增得到一条大小约lkb的雄性多态性片段，这一片段存在于试验所用材料的所有雄株中而两 和测序，获得了该标记的核苷酸特定序列，由1001bp的特定碱基序列组成，该序列已被Genbank 收录，登录号为I)0787854。根据对该片段的序列分析结果重新设计了2对引物将RAPD标记成 功转化成了SCAR标记，并命名为SD—1000。 SCAR 关键词：番木瓜遗传关系雄性性别RAPD Ⅱ formale RAPDandSCARmolecularmarkers traitinCaric L．and papayaPhyl of Cultivars ALIlalysisPapaya 6y Candidate：Ren Chaoxing