磨盘柿离体再生系的建立与遗传转化的初步探索.pdfVIP

摘要 磨盘柿是河北省的名优特产，果实营养丰富并具药用价值，但是柿粜采期集中， 易软化，产地交通不便，烂耗损失严重，大大降低了柿栗的商品率。目前柿栗的贮 藏仍以一些传统的方法，知室内堆藏、露天架藏、自然冷冻贮藏为主，很难使柿子 长期保持较大的硬度，影响柿果贮藏傈鲜期及销售期，利用转基因方法定向改良柿 的性毫跫，尉能从报本上解决柿果闯题。 本论文针对磨盘柿的贮藏方面的问题，研究了磨盘柿的高频离体再生体系，初 步建立了农杆菌介导的ACC合成酶基因遗传转化体系，从而为磨盘柿的培霄、改 良和快速推广提供物质与技术支持。主要结果如下： 1建立了磨盘柿叶片再生体系。本试验结果显示，叶片再生的最佳途径是采用 +2T1．Omg，L中暗培养7天后，在光照条件下诱导愈伤组织和不定芽的形成。30天 后接种于l／2DKW+zT2．0m虮中分化培养30天，不定芽再生率为86％，平均不定 芽数为3．7。 2建立了磨盘柿生根体系。比较直接添加激素法和浸蘸两秘方法生根效果。直 接添加激素法，}B较了不同浓度的IAA、臻A以及基础培莽基和瞎培养时间，对磨 的效果要好与氆A，1．Omg／L的从A为最适浓度；适宜的噻壤养时间为5天。生根 率为93．5％，平均根条数为4，7。IAA的浸蘸效聚要好于IBA，最佳的浸藜方褒为 250涮yL驰执A浸壤15～28瓤n。生摄率为75％，平均根条数1．8。 3初步建立了壤盘婶的基因的遗传转化体系。对转化方法郛转化条件述荨亍了初 步游研究。以蘑盘柿的叶片作为外檀体，培养两天后，用加入50mg，L的As的 基上筛选培养。在培养过程中选用头孢500mg，L挪铺浓秆菌的繁殖，壮观霉紊 50m鳃作为筛选浓度。对部分转基因的再生苗，进行了PcR检测，初步确定2株 的强的基因已整合到其基因缀中。 关键词：磨盘；爵生；生搬；农杆菌；遗传转化 a牲dQ|me蛙c鼢a挪fomation呈Il Vi虹Io smdies蛐Reg蛆er鑫HonSyst啪in Pre鼬妇盯y ‘剿鼬3蚶’PH巍m聃硅圆刍鲥科ms勋赫强#撵矗。) All妞{执糊Tao S印e抖i嚣∞：Ma】、lnl狲l M面or：n姗船yprodtlclprocessingand雏。魁静en衄酬n鐾 Ab鲥柚ct speda封of珏eb自删vince、艇据has “M∞耐’persi㈣is斑嚣搬l锄s·弧d s镪霉ee托蛐e， 彝c辩y锺撑z粥die洳e鞠d嚣。嘲s殛B镭tv出e，y雌蛀lepe耩ifr壤no扭蓼u盛s and area’s ea蛆yso撖商n8prod毪cing cut rate mom㈨ en㈣usly．At心e“Mopan” down“Mop盘王l”persi“挂nangoods wi娅∞mo镌ditionm鞠nslikeme shdf’s p潍imrnOnlaysi飘yet house’s鞋a姝毽p盎nd cause(he a meansdonlt ofhardness，a!￡艳c吐ng persi“黼onkeep10ngperiod persj枷m帆 sale umizethe stage．B砒tll