甘肃桃抗南方根线虫基因的分子标记研究.pdfVIP

摘 要 桃树是世界上广泛栽培的果树之一。根结线虫病是常见的危害桃正常生长 的一种重要病害，选育抗性砧木是预防此类病害的主要途径，寻找与抗根结线 虫性状紧密连锁的分子标记对桃树育种和抗根结线虫机理的研究有重要意义。 南方根结线虫高感品种贝蕾(Prunus 190株实生群体为试材，通过SSR，SRAP分子标记技术对抗南方根结线虫基因进 行了分子标记研究并构建分子遗传连锁图谱，以期对培育或选育抗根结线虫桃 品种以及进一步的相关研究打下一定基础。 主要研究内容如下： (1)试验对红根甘肃桃和贝蕾及其随机挑选的190株BC，代群体进行了田间 南方根结线虫卵块的接种鉴定，经过精细管理，最终13(21群体中有107株感染 南方根结线虫，表现为高感，83株没有被侵染，表现为免疫，鉴定结果符合1： 1孟德尔遗传规律。 p L，dNTPO．6弘L，上下游引物各(】Q碰)0．35丛L， L，10xbuffer(MgCl2)l，01．1 la II u L，ddH。06．5L，共计10L。SRAP体系为模 TaqDNApoierase(5u／u1)0．2 L，dNTPO．6p L， 板DNAl．0pL，10×buffer(MgC]Q2．0laL，引物各(10mM)0．3la 5．6u uL。 uL，ddH20 L，共计10 TaqDNApoierase(5u／u1)0．2 (3)从Bcl群体中挑选5个感病单株和5个免疫单株分别构建感病和抗病 基因池，用135对SSR引物和64对SRAP引物对红根甘肃桃、贝蕾、基因混合 池进行筛选，得到39对SSR引物和43对SRAP引物符合遗传规律和实验要求， 经扩增电泳并统计分析后，共得到141条差异明显的扩增条带，最终构建出一 个覆盖全部8条染色体的较紧密的遗传连锁图谱，覆盖基因组总长为1267．3 cM。 cM，连锁群的平均长度为158．4cM，标记间平均图距为13，2 (4)结合田间抗性鉴定结果，将红根甘肃桃抗南方根结线虫的基因定位在 第二条染色体的顶端，并获得了与抗性基因距离为4．7cM的抗性标记。 (5)用筛选出的特异引物在目前抗南方根结线虫性已知的桃品种上迸行验 证，结果发现抗性品种在95bp的位置都有一条明显的条带，而不抗根结线虫的 品种没有此条带。 关键词：红根甘肃桃；南方根结线虫；SSR；SRAP；遗传图谱；抗性标记 on room—knot The of molecularmarkersSouthern studygene ofP．kansuensisL． nematoderesistant Abstract fruitwhichbe inthe Peachisa widelyworld，Root·knot important planted themostserious in oneof parasitespeach(nw刀US nematodes(Meloidogynespp．)are well弱oftheotherPrunus andthe Rosaceae． persica(L．)Batsch)a