菠萝srap分标记体系的建立及其遗传多样性研究.pdfVIP

摘 要 菠萝是我国南亚热带地区最具特色和优势的热带水果之一，但是菠萝育种研究还 比较落后，面临着大量种质资源的流失、鉴别与分类杂乱且欠准确、遗传距离狭窄、 品种退化等问题，难以适应菠萝产业化发展的需要。如何利用现有的种质资源和合理 选择利用自然变异的优良株系，或者通过人工杂交和诱变的方法来创造新的优良品种 势在必行。本研究对菠萝田间生物学特性进行简单描述，利用S＆心分子标记技术及 流式细胞仪对61份菠萝种质资源进行种质鉴定、分类、亲缘关系及菠萝倍性鉴定等 方面研究，从形态学水平、分子水平以及细胞学水平上评价目前所收集保存的菠萝资 源的遗传多样性，为我国菠萝的生产及育种提供理论依据。研究结果如下： 【1】菠萝属于富含多糖、多酚的植物，且叶片革质化和含多种次生物质，这严重影响 分析。 【2】建立了菠萝S凡廿的反应体系： 10×PCRbu彘r， 最佳的S＆廿反应体系组分为：总反应体积为20儿，包括2．0肛L 1．2u嘲DNA聚合酶，20ng模板DNA，o．2mM姗s，o．3洲引物，2．5mMM矿+。 mm，72℃ PCR扩增程序为：94℃预变性5nliIl；94℃变性lmin，35℃复性1 miIl，72℃延伸1min，35个 延伸1IniIl，5个循环；94℃变性1InjIl，50℃复性1 循环；72℃延伸6n妇，4℃保存。 【3】从99对S凡”引物中筛选出35对引物对61份菠萝种质进行遗传多样性分析，都 得到了清晰的指纹，并且所有品种表现出多态性，说明了S凡廿技术在菠萝品种 态条带比率为67．72％。 【4】利用S＆”标记得到的数据矩阵，采用NeiLi的方法计算出各材料间的遗传相 似系数，应用UPGMA法获得聚类图。表明61份菠萝种质间的亲缘关系较近， 说明所收集的种质遗传基础较窄。在类群的划分上，依相似系数O．83的水平， 可以将供试的6l份菠萝种质分为5种类型。与经典的植物学分类法结果基本一 致。 【5】对6个菠萝主栽区遗传聚类分析，结果表明6个菠萝两两主栽区之间的遗传一致 (GXW)主栽区的遗传一致度(I)最低。 【6】流式细胞仪检测结果表明，所检测的35个样品为同一倍性，都为2倍体。 关键词：菠萝S黜廿遗传多样性流式细胞术倍性分析 J Abstr。act iso船of i11 tIlemostch嬲lcl耐鲥c sub仃0picaland仃0pical Pineapple trcIpical劬its arc私．ThercareSome in也e problemspine印plebreeding disappeared，cl嬲sificationcomplicated，Il姗w genetic wKch iII砌cerlt isVi诅lt01】=tilizetbe c吼not ye郴．n ke印up倘its缸垴trialization crea钯a nature n觥excellcnt rcso切∞es，choo∞t11evari觚t蒯onally，aIld ge加叩l硒m