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本章主要内容 常用的工业微生物 发酵工业菌种的选育 自然选育（发酵工业菌种的分离筛选） 诱变育种 杂交育种 原生质体融合 基因工程育种 工业微生物菌种保藏 二、常用的工业微生物 细菌 醋杆菌属的醋化醋杆菌、弱氧化醋杆菌 乳酸杆菌 枯草杆菌 丙酮丁醇梭菌 大肠杆菌 谷氨酸棒状杆菌 二、常用的工业微生物 放线菌 链霉菌属 小单孢菌属 地中海诺卡氏菌 米苏里游动放线菌 二、常用的工业微生物 酵母菌 酿酒酵母 假丝酵母属 产朊假丝酵母 解脂假丝酵母 热带假丝酵母 毕赤酵母属、汉逊酵母属 二、常用的工业微生物 霉菌 曲霉属 米曲霉 黑曲霉 青霉属 青霉菌：点青霉、产黄青霉 桔青霉 根霉属 德氏根霉 米根霉、小麦曲根霉 红曲霉属 紫红曲霉 未培养微生物 定义：指迄今所采用的微生物纯培养分离及培养方法还未获得纯培养的微生物，其在自然环境微生物群落中占有非常高的比例，约为99％。 极端微生物 研究方法 模拟自然培养法: 原位培养、培养条件优化、 单细胞操作 宏基因组分析法 菌种的改良：是运用遗传学原理和技术对某个用于特定生物技术目的的菌株进行的多方位的改造。通过改造，可使现存的优良性状强化，或去除不良性质或增加新的性状。如自然选育、诱变选育等。 一、菌种的来源 根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买； 从自然界分离筛选新的微生物菌种; 从生产过程中发酵水平高的批号中重新分离筛选。 二、发酵菌种的分离筛选 1. 筛选的指导思想 2.菌种分离筛选在实际中的应用 3.菌种分离筛选步骤 1. 筛选的指导思想 先分离纯化，再结合工艺要求进行筛选。 分离纯化同时结合筛选条件，一步得出所需菌株。 结果有两种可能： 获得适于工业发酵菌株 只获得选育所需的出发菌株 例：青霉素的生产 Fleming分离的点青霉 2μ/mL 1943 产黄青霉 120μ/mL Wis Q176 900μ/mL 目前 85000μ/mL 2. 菌种分离筛选在实际中的应用 从被污染的生产及科研用菌中分离目的菌； 生产中长期使用的菌种的定期分离筛选 ； 从各种育种方法处理的微生物材料中分离筛选适于工业目的的优良菌株； 从已知菌种和大自然中分离新菌株 寻找新的发酵产品的产生菌； 寻找老产品的新的优良菌株。 3. 菌种分离与筛选的步骤 调查研究（包括资料查阅） 试验方案设计 ? ? 含微生物样品的采集 （如何使样品中含所需微 生物的可能性大？） ? ? 样品预处理 （如何在后续的操作中使这种可 能性实现） ? ? 菌种分离 设计筛选方案时必须考虑两个要点 选择性 灵敏度 微生物细胞内含物及其周围的培养基成分非常复杂，目的产物含量往往又极低。因此，需要建立灵敏度高、快速、专一性强的检测方法。 定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培养特性。 采样：有针对性地采集样品。 增殖培养：人为地通过控制养分或培条件，使所需菌种增殖培养后，在数量上占优势。 分离：利用分离技术得到纯种。 筛选：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。 1. 采样 （1）采样对象 以采集土壤为主。一般园田土和耕作过的沼泽土中，以细菌和放线菌为主，富含碳水化合物的土壤和沼泽地中，酵母和霉菌较多，如一些野果生长区和果园内。采样的对象也可以是植物，腐败物品，某些水域等。 1. 采样 （2）采样季节 以温度适中，雨量不多的秋初为好。 （3）采土方式 在选好适当地点后，用小铲子除去表土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、地点、环境条件等，以备查考。为了使土样中微生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步分批寄回，以便及时分离。 含微生物样品的采集 采样时应注意的问题: 土壤微生物的分布 采土深度 土壤植被情况 采样季节 土壤的酸碱度 对于分离筛选新菌种，还存在另两个选择标准： 土壤来源广泛 在已适应相当苛