紫外分光光度法测定络石藤总木脂素提取物中的总木脂素含量.pdfVIP

紫外分光光度法测定络石藤总木脂素提取物中的总木脂素含量 刘美平，于能江·，徐斌，赵毅民 (军事医学科学院毒物药物研究所，北京100850) 囊赛 目的：建≯测定络缸藤总术脂素提取物中总木脂素含量的紫外分光光度法。方法：利用总木脂素提酸物甲黄酮类 rim，紫外分 代表成分芹菜素在波长360nm和278nm等吸收的特点，以络石甘为标准品，测定波长278ilm。参比波长360 光光度法测定总木脂素含量。并结合HPLC指纹图谱方法考察黄酮类成分对测定结果准确性的影响。结果：以络石苷为 标准品，线性回归方程为厶4锄．0057+9．703 石藤提取物中木脂素平均含量为87．57％。而且黄酮类成分基本不影响测定结果的准确性。结论：本研究建立的方法测定 结果准确，操作简便。 关t词络石藤；总木脂素提取物：总木脂索含量；紫外分光光度法 络石藤为夹竹桃科植物络石Trachelospermum 通络，凉血消肿的功效，用于风湿热痹，筋脉拘挛，腰膝酸痛，喉痹，痈肿，跌扑损伤【11。络石藤含 二苯丁酸内酯类木脂素和黄酮两类主要化学成分【2，3，4】和少量的三萜[5】、生物碱【6，7】等成分。现代药 理研究表明络石藤具有抗癌，抗炎等作用，而木脂素类成分是其主要的活性成分【4，8．1l】。因而，络石 藤的总木脂素有效部位可能具有很好的药用开发前景。我们在前期研究中利用大孔树脂吸附法制备得到 了络石藤的总木脂素提取物，活性研究显示该提取物具有显著的抗炎镇痛效果。提取物中总木脂素含量 是控制提取物质量的一个重要环节。因此本文对络石藤总木脂素提取物的总木脂素含量测定方法进行了 深入研究。 。 分光光度法具有操作简便、效率高、成本低的优点。络石藤中含有木脂素成分众多，在测定总木脂素含 量时，HPLC法不但需要众多标准品，而且无法测定存在的大量微量木脂素成分，因此测定结果与分光 光度法的表观值相比，离真实值也有较大的差距。因而我们采用分光光度法来测定总木脂素提取物中的 总木脂素含量。黄酮类成分在木脂素的最大吸收波长处存在吸收，采用单波长紫外分光光度法，无法排 除其中黄酮类成分的干扰。但二苯丁酸内酯类木脂素在黄酮类成分的330--370nm吸收区无吸收，因而 可以从中找到黄酮类化合物在木脂素最大吸收波长处的等吸收波长，以此为参比波长，可以减除黄酮类 成分在木脂素最大吸收波长处的吸收强度。因而，本实验通过研究建立了紫外吸收分光光度法测定总木 脂素提取物中总木脂素含量的方法，结果表明此方法基本不受黄酮类化合物的影响，简单、易行、可靠。 1仪器和材料 Cintra 素对照品(纯度98％，Sigma)：色谱纯甲醇(Fisher)：娃哈哈纯净水；其他试剂均为分析纯。 2方法和结果 2．1测定波长的确定 采用紫外分光光度法对络石苷标准品、络石藤提取物、芹菜素的50％甲醇溶液进行扫描，以50％ 甲醇为空白，扫描范围为200400姗，见图l。 图IUV全波长扫描图 nm处。但黄酮类代表成分芹 山图可见络石苷和络石藤提取物有相似的特征吸收．最大吸收在278 菜桑在278nm处也有一定吸收并与其在360nm处有相同的吸光度，故可采用等吸收法以360am为参 比波长消除干扰组分黄酮娄成分在测定波长278nm处的吸收。 2．2标准曲线 精密称取络石苷对照品477 mL。分别精密量取对照品溶液0．4，0．6， mg，500／o甲酵溶解并定容至10 0．8，1．0．1．2tI 70，5724， 6678 nm，360 PgmL。的对照品溶液。50％甲醇溶液为空白溶液。以对照品溶掖的浓度为自变量，278 nm处测定吸光度的差值为因变量．计算得回归方程删=97033C+00057，r=09997，线性范围为19∞ 78 jxgmL～-+