5.1.5.3 DNA粗提取和鉴定.pptVIP

人教版选修1 专题5 DNA和蛋白质技术 课题1 DNA的粗提取与鉴定 DNA的粗提取与鉴定 一、实验原理 1、血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。 2、DNA和蛋白质等在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同。DNA在物质的量浓度为0.14 mol／L的氯化钠溶液中的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。 3、DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 4、DNA遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 二、方法与过程 1、制鸡血细胞液（活鸡鲜血经分离或沉淀获得） 0.1g/mL柠檬酸钠100mL 活鸡鲜血180mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌，离心、分离或静置沉淀。 2、提取DNA。 ① 取血细胞5-10mL＋20mL蒸馏水，用玻棒沿一个方向快速搅拌。 ② 纱布过滤：滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质。 ③ 原理：血细胞的细胞膜、核摸吸水胀破，玻璃棒快速搅拌，机械加速血细胞破裂。 ⑴ 提取血细胞核物质： ⑵ 溶解核内的DNA： 滤液＋2mol/L的NaCl溶液40mL，玻棒沿一个方向轻缓搅拌。 ⑶ 析出含DNA的粘稠物： ⑷ 滤取含DNA的粘稠物： ⑸ DNA粘稠物的