南瓜蛋白在抗人慢性粒细胞白血病细胞系K562的作用的分析.pdfVIP

目的： 细胞的 液模型和皮下移植瘤模型，并用于评价南瓜蛋白在小鼠体内的抗慢粒活性；为南 瓜蛋白潜在的抗慢性粒细胞自血病的临床应用提供理论基础和实验依据。 方法： 体外培养的K562细胞的增殖抑制作用。皮下注射K562细胞并多次接种传代，建 立K562细胞NOD／SCID小鼠的皮下移植瘤模型。采用X射线照射后尾静脉注 射K562细胞的方法，建立人慢性粒细胞自血病NOD／SCID小鼠的血液模型；通 过外周血细胞和骨髓细胞瑞氏染色、髓系抗原的流式细胞仪检测、组织病理及 RT-PCR检测bcr／abl融合基因等方法对血液模型进行鉴定。分别使用皮下移植瘤 模型和血液模型评价CUS在小鼠体内的抗K562活性。 结果： 南瓜蛋白对体外培养的K562细胞具有明显的增殖抑制作用，强于同类的天 别为8．59mg／L、3．85mg／L和2．39mg／L。皮下注射K562细胞并多次接种传代， 建立K562细胞NOD／SCID小鼠的皮下移植瘤模型。静脉注射5周后小鼠体重下 降明显，活动欠佳。部分动物可见瘤块侵犯，例如眼眶、小腿，卵巢等；血常规 白细胞计数与外周血镜下所示基本一致，白细胞计数不与建模天数成正比。照射 后，外周血白细胞极低。所见以成熟粒系为主，且外周血象仅见一次幼稚细胞； 外周血中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色积分甚低，以排除感染可能：骨髓细胞 增生活跃，油镜下观察所示，幼稚细胞明显；骨髓细胞髓系抗原(CDl3、CD33 和CDll7)动态监测结果显示，空白组(照射未注射K562细胞)髓系抗原表达 没有明显变化，而阴性组(照射且注射K562细胞)的髓系抗原表达渐进升高， 2 与建模天数呈正相关，阴性组小鼠濒死状态髓性抗原表达亦明显升高；肝脾组织 流式细胞术监测CD33表达，空白组和阴性组没有差别，CD33百分比较低且无变 化：雌性小鼠癌肿常侵犯卵巢，将癌肿侵犯脏器组织及肝、脾、肺、肾行病理检 查可示癌肿侵犯脏器呈典型肿瘤组织形态，而肝、脾、肺、肾未见癌肿侵犯及明 见bcr／abl融合基因条带，而肝、脾和外周血未见bcr／abl融合基因条带。小鼠 体内实验结果显示：CUS对K562细胞的皮下移植瘤和血液模型均具有显著抑制 生存时间分别延长24．9％和3696。 结论： l、CUS对体外培养的K562细胞具有明显的增殖抑制作用，并表现为时间和剂量 依赖性。 2、人慢性粒细胞白血病K562细胞--NOD／SCID小鼠血液模型的鉴定方法应以骨 髓涂片、骨髓细胞髓性抗原流式检测、骨髓标本bcr／abl融合基因检测为主。 3、CUS在小鼠体内对人慢性粒细胞白血病细胞系K562具有显著的抑制作用。 关键词：核糖体失活蛋白； 南瓜蛋白； K562细胞；慢性粒细胞白血病 二、Abstract TheeffectofCucurmosin Chronic against LeukemiacellK562 Myeloid aimofthis isobservationthe effectin objective：The study inhibiting humanChronic Leukemiacell Cucurmosin(CUS)． Myelogenous 1ine(K562)by Estimatetheanti—tumor withHuman effectofCUSinvivo ChroniC Leukemiacellinsuitand in micemodel． Myelogenous NOD／SCID xenograft To some theoreticalfoundationonanti—CMLof provide potential Cucurmo