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大肠杆菌DNA聚合酶 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ（DNApolⅠ） 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅱ（DNApolⅡ） 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ（DNApolⅢ） Klenow片段 T4-DNA聚合酶 耐热DNA聚合酶 Taq DNA 聚合酶 pfu DNA 聚合酶 1、5`?3`聚合酶活性：以DNA为模版，在dNTP和镁离子的存在下，催化单核苷酸结合到引物分子的3`-OH末端，沿5`?3`方向合成DNA。 2、5`?3`外切酶活性：可以从5`端降解双链DNA，使之成为单核苷酸，也可降解DNA:RNA杂交体中的RNA成份，即拥有RNA酶H活性。需要5`端游离的磷酸基团 3、3`?5`外切酶活性：从3`-OH末端降解单链或双链DNA分子，降解产物为单核苷酸，当有dNTP存在时， 5`?3`聚合酶活性抑制3`?5`外切酶活性。 DNA polI具有3种酶活性，在基因工程中常用作制备探针。 用枯草杆菌蛋白酶或胰蛋白酶降解大肠杆菌DNA聚合酶I为两个蛋白质片段，其中较小的片段具有5`?3`外切酶活性，较大的片段具有5`?3`聚合酶和3`?5`外切酶活性，称为Klenow片段。 Klenow片段的功能： 1、补平粘性末端 2、标记末端 3、合成cDNA第二链 4、用于Sanger双脱氧末端终止法的DNA序列分析 5、合成杂交探针 常用功能 DNA聚合酶Ⅰ缺陷的突变株仍能生存，这表明DNApolⅠ不是DNA复