分子杂交..pptVIP

The Klenow fragment 去除了E. coli DNA polymerase I 的5’→3’的外切酶活性，具有5’→3’的聚合酶活性及3’ →5’ 外切酶活性。在pH 6.6的条件下，3’ →5’ 外切酶活性被大大降低（有的公司提供无该酶活性的酶） 随机Primer：可通过用DNase I 消化牛胸腺DNA、DNA合成仪合成或直接从公司购买。同位素标记的探针DNA的平均长度与引物的浓度成反比[=k/(lnPc)1/2, Pc 是引物的浓度]，一般可产生~400-600 bp 的标记产物。 随机引物标记体系 模板DNA：一般为线状双链DNA α-32P-d CTP： (放射性比活3000Ci/mmol)?，半衰期14.3天，最大能量1.71 Mev，最大辐射范围：空气中610cm，水中0.8cm，有机玻璃中0.76cm。 或DIG-11-dUTP标记： * * 1 × 5× DNA 7 ?l HindIII (10U/μl) 1 ?l 5 ?