动物体细胞核移植技术和克隆动物..ppt

知识回顾 英国计划生产人造皮肤 对比：动物细胞培养、植物组织培养 动物细胞培养要经过脱分化吗？为什么？ 概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 １、动物的克隆与植物克隆一样吗？ 4、动物克隆实例很多，为何多利就举世闻名呢？ 4.动物克隆实例很多，为何多利就举世闻名呢？ 知识结构 动物细胞培养和核移植技术 * * 无菌、无毒 消毒、灭菌、抗生素、定期更换培养液（清除代谢废物） 营养 合成培养基（血清、血浆） 温度和pH 36.5±0.5℃，7.2---7.4 气体 95%空气，5%CO2 动物组织 分散成单个细胞 细胞悬液 培养 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 原代培养 传代培养 动物细胞培养的结果：细胞群或细胞产物 　　众所周知，治疗烧伤需要做皮肤移植手术，这对烧伤病人来说可谓雪上加霜。他们本身已经够痛苦的了，还要进行皮肤移植，这意味着将从他们所剩无多的好皮肤上再移走一块。也就是说，这些已经受伤的患者，身上还要平添一处新的伤痕。 　　如今，英国一家公司在实验室中培育出人造皮肤，有望结束烧伤患者的皮肤移植之痛。 　　据英国《每日邮报》报道，小块的皮肤移植已经进入临床实验阶段。医生在6名志愿者的手臂上分别取下不足7平方厘米的皮肤，然后种上人造皮肤，用无菌的绷带包扎好。28天后，志愿者们的皮肤伤口全部愈合，几乎没留下什么疤痕，而且这些志愿者也没有任何排异反应，预后比较理想。 　　人造皮肤的厚度与真正的皮肤也是一致的，皮肤由纤维蛋白原、血凝酶和纤维原细胞等所合成的基质组成。在显微镜下，它们几乎无异于自然生长的皮肤，甚至可以清晰地看到纵横密布的血管。 . 脱分化 分散处理 结果 培养基 原理 动物细胞培养技术 植物组织培养技术 细胞全能性 细胞有丝分裂 固体,营养物质,激素 液体,营养物质,血清等 完整植株 细胞群或细胞产物 无 有 有 无 植物组织培养技术是植物细胞工程技术的基础。 动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。 复习植物细胞工程和动物细胞工程的部分内容。 思考 动物细胞的培养有各种用途，一般而言，动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。 卵细胞 C母绵羊子宫 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 胚胎移植 早期胚胎 多利羊 分娩 卵裂 融合后的卵细胞 细胞拆合技术 妊娠 多莉羊的培育过程 核移植 （难度高） 受体细胞是MⅡ期的卵母细胞 动物体细胞核移植技术和克隆动物 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 ２、用动物体细胞进行克隆的过程,其实际操作过程是什么？ 动物克隆过程的实际是细胞核移植 不一样 思考题 体细胞核移植的过程（以高产奶牛为例） 体细胞 培养 甲牛 乙牛 MⅡ卵母细胞 去除核 去核卵母细胞 重组 细胞 卵裂 重组胚胎 代孕母牛丙 移植 体细胞群 克隆牛 细胞核移植 胚胎移植 物理或化学方法激活 体细胞 注入 细胞融合 请看教材P48图2-21 思考： 1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？用此细胞作为受体细胞有什么好处？ 2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？ MⅡ中期卵母细胞 诱导方法：物理或化学方法激活受体细胞，完成 细胞分裂和发育进程。 卵母细胞体积大，便于操作；含有营养物质丰富，提供早期胚胎发育所需的营养；含有激活细胞核体现全能性的物质。 供体细胞（供核） 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质） 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 归纳: 1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植 2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状 3.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质有两个亲本的性状 细胞培养 1、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 思考题 2、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 3、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？ 5、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？ 6、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？ 1、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是，