质粒载体创新.pptVIP

质粒载体 plasmid 主要内容 载体的概念及特点 载体的分类 质粒载体 教学目标 通过本节课的学习，学生要掌握载体的主要特点，其应该具备的元件，会灵活设计一系列的实验来证明宿主内转入了载体。 第一节 载体的特点 一．载体的概念 1.要把一个有用的基因（目的基因——研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具（交通工具），将外源DNA或者基因携带进入宿主细胞的工具。 　　2.凡来源于质粒或噬菌体的DNA分子，可以插入或克隆DNA片段统称为vector。 　　基因工程所用的vector实际上是DNA分子，是用来携带目的基因片段进入受体细胞的DNA。 二、载体应具备的条件 在宿主细胞内能够进行自我复制，具备复制原点。 有合适的限制性内切酶位点，每种位点最好有且只有1 个，供外源DNA的插入且不影响其复制。 有选择标记，例如抗药性标记，蓝白斑试验，便于筛选。 有一定容量且有较高的拷贝数，易于制备。 多克隆位点 ori 复制起始点 遗传标记 Amp polylinker 三、载体的分类 分类依据 类 别 克隆扩增或表达 举 例 按功能 （1）克隆载体 （2）表达载体 √ 　　　√ PBR322 PCDN3 按进入受体细胞类型 （1）原核载体 （2）真核载体 （3）穿梭载体 PUC8 PBUDCE