4型戊型肝炎病毒ORF2多肽的二聚体特性和抗原性特征.pdf

JMicrobiol ·993· 虫堡邀生物堂麴丝瘥堂盘查!螋笙!!旦箜垫鲞筮!!翅Chinlmmunol,November_200．8,V01．28,_No．11 ．病毒学． 4型戊型肝炎病毒ORF2多肽的 二聚体特性和抗原性特征 潘金顺 庄辉 吴超 周锦勇 唐勤 周乙华 E 【摘要】 目的研究4型戊型肝炎病毒(hepatitisvirus，HEV)开放阅读框架2(openreading frame 2，ORF2)编码的多肽二聚体特性和抗原性特征。方法从患者血清克隆HEVORF2基因，在 大肠杆菌中表达不同长度的ORF2多肽，并表达点突变多肽，纯化后在SDS．PAGE不同条件下分析二 聚体特性，同时用Western blot分析其抗原性特征。结果由459～607位氨基酸构成的ORF2多肽 能形成二聚体。而在氨基端截短13个氨基酸或在羧基端截短13个氨基酸均不形成二聚体，562位天 冬酰胺、595位异亮氨酸分别突变后在SDS作用下仅以单体存在。Westemblot显示，抗．HEV仅与二 聚体的ORF2多肽反应，而不与单体ORF2多肽或截短肽反应。结论4型HEVORF2多肽形成二聚 体必须含有459～607位氨基酸，其中562位和595位氨基酸突变能影响二聚体的稳定性。该多肽的 抗原性取决于二聚体结构。 【关键词】 戊型肝炎病毒；ORF2多肽；二聚体；抗原性；点突变 ofthe and 4 Characterizationhomodimer of of E antigenicityoR眩polypepfidesgenotypehepatitis virusPAN Yi．hun． Jin—shun‘。ZHUANGHui．WUChao。zHoUJin-yong．TANGOin．zHoU Medicineand Diseases．D形mTower Medi- ‘DepartmentsofLaboratory Infectious HospitalNanjingUniversity cal Mo如cular School，Jiangsu研Laboratoryof Medwine，№彬昭210008，China author：ZHOU Corresponding Yi．hua．Email：zgr03summer@126．tom To characterizethedimerizationandthe ofthe0RF2 【Abstract】objective antigenicity polypep— tideof E HEVORF2wagclonedfromtheserunlofa hepatitisvirus(HEV．genotype4)．Methods gene with E．The wagdetermined 0RF2 in patienthepatitis genotype bysequencing．Threepolypeptidesdiffering sizeandother with mutationswere inEcoli．Therecombinant polypeptidespoint produced polypeptides were and SDS．PAGEandWesternblot．ResultsTheORF2 purifiedanalyzedby