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2016-02-16 发布于贵州
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乳酸脱氢酶的克表达及酶学性质的研究.pdf

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乳酸脱氢酶的克表达及酶学性质的研究

摘要摘要乳酸脱氢酶的克隆表达及酶学性质的研究学科、专业：工科食品科学硕士研究生姓名：贾江花指导教师：江波教授 acid，PLA)是一种新型生物防腐剂，乳酸脱氢酶(1actate 苯乳酸(phenyllactic acid bacteria，LAB)中转化苯丙酮酸 dehydrogenase，LDH)是乳酸菌(1actic (phenypyruvate，PPA)生成苯乳酸的主要酶。知，植物乳杆菌有三个乳酸脱氢酶基因，分别为ldhLl、ldhL2、ldhD，三个基 WCFSl的三个乳酸脱氢酶基因设计引物，并以植物乳杆菌根据L．plantarum ldhLl(Gene 结果表明：植物乳杆菌SK002 bank登录号FJ712707)基因长度为 963 bank登录号FJ712706)基因长度为999 bp；ldhD(Gene bp；ldhL2(Gene bank登录号为FJ392647)基因长度为930 bp。将三个基因连入表达载体，并导入大肠杆菌BL21(DE3)中，成功诱导表 kDa。达并纯化出三种重组乳酸脱氢酶。三种酶的蛋白分子量分别为35、34、40 测定三种重组酶对底物苯丙酮酸的活性，发现：L2．LDH对苯丙酮酸的比活力仅为0．06 U／mg；L1．LDH为71．06 活力为215．84 L1．LDH的pH稳定性及热稳定性均好于D．LDH。在各自的最适测定酶活条件下，测定两种酶对丙酮酸及苯丙酮酸的‰。L1．LDH对丙酮酸及苯丙酮酸Km mM。分别为0．23、3．96mM；D．LDH对丙酮酸及苯丙酮酸‰分别为0．06、5．4 关键字：苯乳酸，苯丙酮酸，植物乳杆菌，乳酸脱氢酶，分子克隆，诱导表达，基因工程菌 Abstract Abstract anovelantimicrobial acid(PLA)iS compound．Lactate Phenyllactic themain for enzymeconverting dehydrogenase(LDH)is PLAinlacticacid tothe ofLactobacillus bacteria(LAB)．Accordinggenome WCFS arethreelactate 1，there 1，IdhL2， plantarum dehydrogenasesgenes：ldhL which are IdhD products this the