人乳腺癌细胞mf-7中bmp-6、tgf-β对δef1启动子活性调控的研究.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 factor 1)隶属于一类转录因子超家族。 8EFl(6．erystallinenhancer-binding 体内、体外研究结果显示，8EFl具有广泛的转录抑制功能。本实验室前期研究 发现，在乳腺癌EMT(epithelial．mesenchymal 癌细胞中8EFl受到BMP．6的调控从而参与乳腺癌细胞EMT。但是到目前为止， 有关BMP．6调控8EFl转录的分子机制未见报道。此外，已有研究表明，TGF．13 8EFl的表达来进一步影响下游信号通路。本文拟在前期研究基础上，深入探讨 在乳腺癌细胞中BMP-6和TGF．D调控8EFl转录的分子机理。 为此，本文以人乳腺癌细胞系MCF．7为模型，构建了五个不同截短长度的 野生型人8EFI(…2381215)启动子一荧光素酶报告基因质粒，分别与 pCDNA3．BMP2／6共转染至MCF．7细胞中，荧光素酶活性检测各启动子活性。 采用定点诱变法对该段启动子上的APl结合位点进行突变，构建了该位点突变 8EFl启动子(…522 分别刺激瞬时转染8EFl不同截短长度启动子一荧光素酶报告基因质粒的MCF．7 研究发现：[1]BMP．6对8EFl不同截短长度的启动子都具有转录抑制作用。 8EFl启动子(．522～215)中APl结合位点的突变可以有效地减弱BMP．6对该 启动子的转录抑制作用；【2】TGF．13对6EFl各个长度的启动子均有不同程度的 转录激活作用，TGF．B刺激APl结合位点突变的启动子，荧光素酶活性与野生 型相比无显著变化。 中文摘要 因此，在乳腺癌细胞中，BMP．6对8EFl启动子的转录抑制作用可能是通过 现对8EFl的转录调控作用，从而参与乳腺癌细胞EMT的过程。TGF．B在调控 乳腺癌EMT中所起的作用与BMP．6相反，它可以激活8EFl启动子的活性，并 且该过程也有可能是由MAPK／APl信号通路介导的。 关键词：BMP．6；TGF．p；8EFl；转录调控 n Abstract Abstract 8EF factor amemberofzinc—finger I(6-crystallinenhancer-binding1)is homeodoman invivoandinvitrostudiesrevealthat transrepressorsuperfamily．The our 8EFI hastheextensivefunctionof inhibition．In transcriptional previously 1 hasbeendiscoveredtoexhibit onthehuman investigation,SEF transrepression the Can E-cadherin direct to E2一box．Moreover,BMP-6indirectly promoterby binding E—eadherin the of8EF activatethe I．Thus， t