普洱茶降糖降脂性成分的研究.pdfVIP

普洱茶降糖降脂活性成分的研究 摘 要 普洱茶是中国黑茶类的特种名茶，饮用历史悠久。经药理研究证明普洱茶具 有降糖降脂的显著疗效。随着人们对生活质量的提高以及追求健康的迫切需要， 普洱茶已越来越受到众多消费者的喜爱。但由于普洱茶中的功效成分不明，严重 地阻碍了普洱茶健康产业的发展。因此，本研究采用现代化分离纯化技术与高通 量药理活性筛选技术相结合对普洱茶的降糖降脂活性因子进行追踪分离，旨在为 全面、系统、合理的开发利用普洱茶资源提供一定的理论依据。取得的主要研究 结果如下： 1、普洱茶提取物药理活性的高通量筛选研究 高通量筛选是目前药物筛选的主流技术，该技术具有微量、快速、高效的特 点，因而被国外药物研究机构广泛采用。本研究首次对普洱茶活性因子进行PPAR 模型的高通量筛选研究。结果表明，普洱茶各粗提物对PPARct受体的激活作用 很弱，醇提比水提更容易浸出激活PPAR受体的活性成分；在醇提物中，石油醚 萃取部分对PPAR8受体激活作用最强，激活倍数为2．023，氯仿萃取部分与乙酸 乙酯萃取部分对PPART受体有激活作用，激活倍数分别为1．554和1．531。这一 筛选结果提示：在普洱茶的粗提物中，石油醚萃取部分，氯仿萃取部分，乙酸乙 酯萃取部分可能是其降糖降脂的活性部位。 2、普洱茶提取物中Ⅱ．淀粉酶抑制剂的筛选研究 对仳一淀粉酶抑制剂的筛选是降糖降脂药物筛选的另一有效方法。本研究首次 探讨普洱茶对Ⅱ一淀粉酶的抑制作用，以期从中开发出高活性的Ⅱ一淀粉酶抑制剂。 研究结果表明，普洱茶的醇提石油醚萃取部分对Ⅱ一淀粉酶的抑制作用最强，在6 mg／ml之间有良好的量效关系；对醇 mg／ml时其抑制率达69．86％，并且在2—10 提石油醚萃取部分进行硅胶柱层析，并对收集的各组分进行Ⅱ一淀粉酶的抑制作用 研究，得到乙酸乙酯洗脱部分的抑制作用最强，是同等情况下石油醚萃取部分抑 制效果的1．5倍，是同等情况下醇提物抑制效果的3倍。由此揭示普洱茶醇提石 油醚萃取部分乙酸乙酯洗脱物中含有高活性的cc一淀粉酶抑制剂。此外，本研究还 对普洱茶中c【，淀粉酶抑制剂的提取工艺进行探讨，获得的最佳提取条件为：浸提 时间3h，固液比1：5，乙醇浓度90％。 3、普洱茶醇提物乙酸乙酯萃取部分的纯化及其活性的高通量筛选研究 茶多酚是茶叶功能成分研究的重点之一。本研究以醇提乙酸乙酯萃取部分作 为活性成分追踪分离对象，继续进行活性成分分离纯化与活性强度探讨。筛选出 分离活性成分的最佳大孔树脂为NKA一9，建立了监控活性成分分离的高效液相 法，得到了NKA．9树脂的最佳洗脱条件，以便于各分离组分进行下一步的活性 筛选；筛选结果显示：水洗部分、30％乙醇洗脱部分、50％乙醇洗脱部分均表现 出较好的降糖降脂活性，其中降糖活性以水洗部分(II一1)活性最高，对PPAR7 受体的激活倍数达2，171；降脂活性以50％乙醇洗脱部分(II一3)活性最高，对 茶素组分含量最高的30％乙醇洗脱部分(II，2)虽然在筛选中也表现出降糖降脂 活性，但其降糖活性不及II．1组分，降脂活性不及II一3组分。综合各组分的化 学成分分析，说明乙酸乙酯萃取部分中极性较大的水溶性成分降糖活性最强，极 性较小的脂溶性成分降脂活性最强。 4、普洱茶降糖降脂功能成分化学研究 以水洗部分(II．1)继续追踪分离活性成分，得到2个单体化合物v一1、 v一2。经高效液相色谱确定化合物的纯度后，结合其理化性质，利用紫外光谱、 红外光谱、核磁共振、质谱等波谱分析，鉴定其化学结构分别为尿嘧啶、没食子 酸，其中尿嘧啶为首次从后发酵的黑茶类中获得。 5、普洱茶中功能成分单体降糖降脂作用研究 首次对普洱茶中分离获得的单体化合物尿嘧啶和没食子酸进行了生物活性 的高通量筛选，结果证明尿嘧啶和没食子酸具有降糖降脂作用。由于普洱茶没食 子酸对PPAR模型的激活作用强，含量高，可能是普洱茶降糖降脂作用的主要活 性成分之一；尿嘧啶对PPAR模型的激活作用相对较弱，含量相对较低，可能是 普洱茶中降糖降脂作用的辅助成分之一。由此可见，普洱茶降糖降脂作用机制可 能是通过多途径、多靶点来实现的。 关键词：普洱茶；活性成分；高通量筛选；Ⅱ一淀粉酶抑NN；降糖降脂作用 On for StudiesActive