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四个新的鸽β-防御素抗新城疫病毒作用机制的初步研究
目 录
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目 录 Y2621210
中文摘要…………………………………………………………………………………………………I
英文摘要………………………………………………………………………………………………．．III
1 j；I言……………………………………………………………………………………………………………………………………．1
1．1抗菌肽简介………………………………………………………………………………………l
1．2防御素的研究进展………………………………………………………………………………l
1．2．1防御素的定义………………………………………………………………………………．1
1．2．2防御素的结构特征与分类…………………………………………………………………．1
1．2．3防御素的应用………………………………………………………………………………．3
1．3禽AvBDs的研究进展…………………………………………………………………………．．3
1．3．1禽AvBDs的结构特征………………………………………………………………………3
1．3．2禽AvBDs重组蛋白的制备…………………………………………………………………4
1．3．3禽AvBDs的生物学特性……………………………………………………………………4
1．3．4禽AvBDs的组织分布………………………………………………………………………4
1．3．5禽AvBDs的诱导表达………………………………………………………………………5
1．4Toll样受体的研究进展…………………………………………………………………………。5
1．5研究目的与意义…………………………………………………………………………………6
2材料与方法……………………………………………………………………………………………7
2．1材料………………………………………………………………………………………………………………………………7
2．1．1菌株及质粒载体……………………………………………………………………………．7
2．1．2药品、试剂及配制…………………………………………………………………………．7
2．1．3主要仪器……………………………………………………………………………………．8
2．2鸽B．防御素基因的克隆与序列分析……………………………………………………………9
2．2．1实验用动物及组织样品的采集……………………………………………………………．9
2．2．2组织总RNA的提取…………………………………………………………………………9
2．2．3反转录聚合酶链式反应(RT．PCR)………………………………………………………9
2．2．4
RT-PCR产物的回收………………………………………………………………………一10
2．2．5 0
PCR产物的连接……………………………………………………………………………l
2．2．6感受态细胞的制备…………………………………………………………………………l1
2．2．7连接产物的转化……………………………………………………………………………11
2．2．8碱裂解法质粒的提取………………………………………………………………………11
2．2。9重组质粒的PCR鉴定与测序……………………………………………………………．．12
2．2．10基因序列分析及同源性比较……………………………………………………………．12
2．3重组鸽B．防御素蛋白的原核表达……………………………………………………………．．12
2．3．1原核表达载体的构建………………………………………………………………………12
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