牛源大肠杆菌耐性及耐药机制研究.pdfVIP

摘要 摘 要 致病性大肠杆菌是引起犊牛白痢的主要病原菌，近年来其耐药性在全球普遍呈迅速上升 趋势。许多国家和地区通过对犊牛白痢的流行病学调查和牛源大肠杆菌的耐药性监测，积累 了翔实的牛源大肠杆菌耐药性及其流行资料，并结合分子生物学方法研究了牛源大肠杆菌耐 药性的传播规律，这些研究对所在地区犊牛白痢的防治和治疗发挥了重要作用。黑龙江省关 于牛源大肠杆菌的研究较少，尤其犊牛大肠杆菌的耐药性及其传播仍缺乏详细的研究资料。 为此，我们对黑龙江周边地区养牛场的大肠杆菌进行了分离鉴定，对耐药谱和耐药基因进行 了研究，并比较了基因分型和耐药表型的相关性。 本研究采用细菌学方法分离鉴定大肠杆菌，采用WHO推荐的K-B纸片法研究不同来源的 菌株对13种抗菌药物的敏感性。获得26株犊牛源耐药大肠杆菌。这些耐药菌对8种药物产生了 耐药性，其中牛源大肠杆菌对链霉素、阿莫西林、四环素、复方新诺明和多西环素的耐药率 较高，对前四种药物的耐药率达到了100％，对多西环素的耐药率也高达96．15％；但耐药菌株 对庆大霉素、丁胺卡那霉素、多粘菌素B和新霉素表现为100％敏感，对恩诺沙星、环丙沙星、 诺氟沙星和氯霉素耐药程度较低，耐药率分别为3．85％、8．89％和11．54％和19．23％。由此可见， 养牛场大肠杆菌分离株的多重耐药现象较严重。 本研究考察了不同型另UESBLS基因CTX．M、TEM、SHV在以上分离菌株中的流行情况， 结果发现：bl嬲．M基因检出的阳性率为19．23％；blaTEM基因检出的阳性率为84．62％； blaSHV基因未检出。发现质粒介导的ESBLS的产生和传播是导致分离菌株对阻内酰胺类抗菌 药物耐药的重要机制；耐药菌株中检出2种氨基糖苷类乙酰基转移酶基因，aadAl基因检出的 性，结果表明对氨基糖苷类耐药的主要机制是细菌产生氨基糖苷类修饰酶；氯霉素耐药基因 耐药菌株的出现势必给临床治疗带来困难。应注意临床合理用药，控制耐药趋势的发展。 采用PCR技术从耐氟喹诺酮类药物的大肠杆菌中选取4株扩增了GyrA基因、GyrB基 并且证明GyrA、ParC亚基上发生的氨基酸替代是该地区耐药菌对氟喹诺酮类药物产生耐药 性的主要机制之一。 采用脉冲场凝胶电泳(PF(陋)对牛源耐药大肠杆菌进行研究，并将其结果与耐药表型结 果进行比较。结果表明：26株菌可分为—■G共10型，其中B型被分了B1、B2和B3三个亚型。 试验结果表明耐药表型和基因图谱并不是完全对应关系，但耐药表型相同的菌株其PFGE电泳 图谱相同的概率较高，同一养殖场不同耐药表型的菌株都存在PFGE指纹图谱完全相同菌株， 相同PFGE分型的菌株其耐药谱型不一定相同。试验证明养殖场动物之间存在多重耐药大肠杆 菌的克隆传播。 关键词大肠杆菌；耐药性；耐药机制；脉冲场凝胶电泳 Abstract 皇詈曼曼皇鼍皇皇皇毫曹鼍毫皇II II篁曼皇皇置毫量曼曼吕皇曼皇曼詈量曼曼寡曼曼曼皇皇曼詈曼曼皇烹曼曼皇曼量皇舅量毫曼皇皇皇曼曼皇曼曼曼曼曼兰曼曼鲁皇 ANTIBIOTIC SRUDYON MECHANISMOF ANDRESISTANCE BOVINEE．COLI Abstract EscheHchia isall bacterialofwhitediarrheaof Pathogenic coli(E．C0lnimportantpathogen antimicrobialhasbeen bovine．Inrecent resistanceofE．colito agents rapidlyincreasing years，the data in countriesthe to countriesand onresistance