牛病毒性腹泻病抗体间接elisa检测方法的建立及临床血清学调查.pdfVIP

摘 要 摘 要 牛病毒性腹泻病（BVD ），是由牛病毒性腹泻病毒（BVDV ）引起的一种疾病，又称黏膜 病。牛病毒性腹泻病毒可以感染各个年龄段的牛，在全世界广泛分布。其临床症状主要表现 为腹泻，急、慢性黏膜病，持续性感染与免疫耐受，免疫抑制，母畜流产、死胎和畸胎等。 急性感染可表现为短暂的腹泻或者肺炎，通常呈群组暴发流行。急性型通常有出血综合症， 死亡率高。犊牛感染该病毒通常比较温和且不表现临床症状。由于其能引起繁殖系统病变并 能形成持续感染，因而对养牛业有着重要的影响。 BVDV 与猪瘟病毒（CSFV ）、羊边界病病毒（DBV ）及部分未分类瘟病毒同属于黄病毒 科瘟病毒属，均为单股正链RNA 病毒。瘟病毒属成员中的病毒过去被认为是宿主特异性的， 但后来的研究表明BVDV 与DBV 可以感染更广泛的宿主，它们不但可以感染牛和羊，并且 可以感染包括猪在内的多种偶蹄类动物。BVD 具有特征性的临床症状的较少，在实际生产中 常常不易被诊断，加之本病的病死率不高，未能引起人们的足够重视而忽视本病的存在，因 此各牛场牛群缺乏系统的监测防制措施，这也是导致我国牛群BVDV 感染日益扩大的原因之 一。由于BVDV 对牛能形成持续性感染，并且其对养牛业危害极大，因此对牛群进行普查， 检测其感染情况，淘汰感染个体，成为本病防制的重要环节。 BVDV 的非结构蛋白NS3 在瘟病毒属中非常保守，是一种免疫优势蛋白，在自然感染或 者弱毒活疫苗免疫后的动物体内均可检出针对该蛋白的抗体。本实验室筛选出BVDV NS3 蛋 白中有免疫反应性的重组片段（rBVDV-NS3b ）作为包被抗原，建立了一个BVDV 抗体检测 的间接ELISA 方法，与进口同类试剂盒的符合率为91.3% 。 为了解黑龙江省内 BVDV 的感染情况，用本实验室建立的 BVDV NS3 蛋白抗体间接 ELISA 检测方法对黑龙江省内不同地区的4 个奶牛养殖场2006 年~2008 年的1 388 份血清样 本进行 BVDV 抗体检测。结果显示 4 个奶牛养殖场该 3 年平均 BVDV 血清阳性率分别为 54.66%、57.68%、62.90%，表明在黑龙江省奶牛养殖场中牛病毒性腹泻病毒感染率较高，并 且呈逐年上升趋势。 关键词 牛病毒性腹泻；黏膜病；感染；酶联免疫吸附试验；非结构蛋白；临床应用 -I- Abstract Establishment of An Indirect ELISA for Detection of Antibody Against Bovine Viral Diarrhea Virus and Its Clinical Serology Investigation Abstract BVD is a disease caused by BVDV, also known as mucosal disease. Distribution of the virus is world-wide. Bovine infected by BVDV showed diarrhea, acute and chronic mucosal diaease, persistent infection and immunotolerance, immunosupression, pregnant cow abortion, dead fetus and abnormal fetus. Acute infections may result in transient diarrhoea or pneumonia, usually in the form of group outbreaks. Acute forms of the disease associated with high m