猪星状病毒分离定和分子流行病学调查及生物学特性研究.pdfVIP

猪星状病毒分离鉴定和分子流行病学调查及生物学特性研究 摘要 泻性疾病有关，目前广泛分布于世界各地。星状病毒常同冠状病毒、轮状 病毒、嵌杯状病毒及其它肠道病毒混合感染造成急性胃肠炎，尤其对小孩 及幼畜危害最大。本研究对猪星状病毒进行分离鉴定和分子流行病学调查 及生物学特性研究，将为今后预防猪星状病毒感染和传播提供实验方法和 手段。 通过对广西某猪场经RT-llPCR检测呈猪星状病毒阳性的粪样进行病毒 分离，获得两株能在PK_15细胞上增殖，并能使该细胞变大、胞浆内出现 颗粒，最后细胞破碎、脱落等细胞病变的病毒；在电镜下观察，该病毒呈 典型的星状结构，直径约28～35I吼；动物实验显示，攻毒猪出现温和性腹 泻，体重减轻，肠系膜淋巴结肿大和肠绒毛变短等临床症状和在绒毛上皮 细胞层及绒毛腔有大量淋巴细胞及少量巨噬细胞浸润等病理变化。病毒的 成功分离，为猪星状病毒分子生物学以及致病机制的研究提供材料。 东湛江2个不同规模化猪场共315份猪腹泻样品进行检测，结果显示猪场 54．3％(38／70)。调查结果表明，猪群中普遍存在猪星状病毒感染。另外， l 本研究克隆所得46株P怠Ⅳs核苷酸同源性为84．6％～100％，氨基酸同源 状病毒I型，且又可分为5个亚群。这是首次对我国猪场进行大规模猪星 状病毒分子流行病学研究。 参考GeIlBaIlk上发表的猪星状病毒亚基因组序列，设计1对引物，对 猪星状病毒广西流行株衣壳蛋白基因进行扩增，最终克隆得到 3’端有 79．4％；在ORFlb和ORF2连接处有一段高度保守的序列，在ORF2 一段83个核苷酸长度的非翻译序列及一个含43个核苷酸高度保守的茎环 区域为抗原表位区。本研究不仅丰富了猪星状病毒衣壳蛋白基因序列，也 为基因疫苗和诊断试剂盒的研制提供材料及理论依据。 关键词： 猪星状病毒分子流行病学分离与鉴定基因克隆 抗原性预测序列分析 Ⅱ ISOLATIONAND EPⅡ)ENⅡOLOGYANDBIOLOGICALCHARACTERjSTICS STUDYOFPORCINEASTROVIRUS ABSTRACT A蛐roVirusare isolated岱Dm zooIlotic a11dhaVebeen Immerous pamogen 幽al iIl诧ctionwas wodd【wide． speCies，mcludir培hllII姗s．As仃oV讯Jsreported ncallcause i11f．eCtionwimthe coronavims， aCu：te触enteritis诎lerl商xed and劬erentericVir吣．nh嬲beenmosth羽曲ltol caliciVims，“黼irus cmldrell趾1d ofthjs w懿t0 yom培aIlimalsparticularly．Thep删节ose study metllodsa11dmeanst0 iIl佗ction锄d pr0忻deexp豳entm preVent communicationof astroVns ofis01ation甜ldidemification