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犬细小病毒乳胶集快速检测方法的建立和应用
犬细小病毒乳胶凝集快速检测方法的建立和应用
目 录
摘要………………………………………………………………………………………．．i
ABSTRACT………………………………………………………………………………ii
第1章文献综述…………………………………………………………………………l
引言……………………………………………………………………………………………………………………．1
1．1CPV的病原学……………………………………………………………………1
1．2CPV的流行情况…………………………………………………………………1
1．2．1
CPV的分子流行情况……………………………………………………．1
1．2．2
CPV的流行特点…………………………………………………………．2
1．3犬细小病毒病的临床症状………………………………………………………3
1．4CPV的感染机制…………………………………………………………………3
1．5CPV的诊断………………………………………………………………………4
1．5．1病毒分离(VI)…………………………………………………………．4
1．5．2血凝试验(HA)…………………………………………………………4
1．5．3酶联免疫吸附反应(ELISA)…………………………………………一4
1．5．4聚合酶链式反应(PCR)………………………………………………．5
1．5．5胶体金检测方法…………………………………………………………．5
1．5．6乳胶凝集试验检测方法(LAT)…………………………………………5
1．6CPV的预防与治疗………………………………………………………………5
1．6．1CPV的预防………………………………………………………………．5
1．6．2
CPV的治疗………………………………………………………………．6
1．7本研究的目的和意义……………………………………………………………6
第2章材料与方法………………………………………………………………………7
2．1试验材料…………………………………………………………………………7
2．1．1细胞、病料、菌种、载体、抗体………………………………………．7
2．1．2相关试剂及耗材…………………………………………………………．7
2．1．3主要试剂及溶液的配置…………………………………………………．7
2．1．4试验器材…………………………………………………………………．9
2．1．5本研究所用寡核苷酸引物………………………………………………．9
2．2试验方法…………………………………………………………………………9
2．2．1乳胶颗粒致敏……………………………………………………………．9
华中农业大学2013届硕士研究生学位论文
2．2．2犬细小病毒乳胶凝集检测方法的操作步骤和结果判定………………10
2．2．3抗体与乳胶偶联条件的优化……………………………………………10
2．2．4犬细小病毒乳胶凝集检测试剂的敏感性和特异性……………………10
2．2．5犬细小病毒乳胶凝集检测试剂的重复性试验…………………………11
2．2．6犬细小病毒乳胶凝集检测试剂的保存期试验…………………………1l
l
2．2．7犬细小病毒病料的采集及流行病学调查………………………………1
2．2．8犬细小病毒乳胶凝集与胶体金试纸条和PCR检测方法的比较……．．15
第3章结果与分析……………………………………………………………………．．16
3．1抗体与乳胶偶联条件的优化……………………………………………………16
3．1．1最佳偶联抗体量的确定…………………………………………………．16
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