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胃蛋白酶、胰蛋白酶对大豆凝集素稳定性的影响 摘要 本试验以纯化的大豆凝集素(SBA)为研究对象，体外研究了动物体内两大主要蛋白 消化酶，胃蛋白酶和胰蛋白酶对其降解作用。试验通过SDS．PAGE凝胶电泳方法分析了 SBA经蛋白酶酶解后的降解程度；通过间接竞争ELISA方法测定其在酶解过程中的免疫 活性的变化。 6B亲 和层析体系进行分离提纯而得到的。应用的抗SBA多克隆抗体是以纯化的SBA免疫动 物而获得，并采用饱和硫酸铵法对抗SBA多克隆抗体进行纯化。利用提纯SBA和纯化 酶解过程中的活性变化。 在蛋白酶酶解SBA试验中，将SBA设为五个浓度梯度和九个时间梯度进行酶解反 Linear 应，试验结果应用SPSS统计软件中的GereralModel模块进行统计分析。试验期 间，要求蛋白酶活性必须保持稳定，因此参照中国2005药典中胃蛋白酶和胰蛋白酶的 活性测定方法对其进行了实时监测。 胃蛋白酶酶解SBA试验结果表明：SBA可缓慢的被胃蛋白酶降解，SBA浓度越高， 表现为完全降解时间越长，随着SBA的降解，SBA的免疫活性也逐渐减小至消失，活 性消失速度随酶解时间的延长而逐渐变慢，并且，在本试验的酶浓度下，SBA浓度越高 活性减小的速度越快，但活性完全消失的时间延长。 胰蛋白酶作用SBA试验结果表明：SBA不能被胰蛋白酶降解，并且酶解过程中SBA 的活性也保持完好，说明SBA对胰蛋白酶有很好的稳定性。 综上所述，SBA是一种可以被胃蛋白酶降解的蛋白质，但较长的作用时间和一定胃 蛋白酶浓度，一旦胃中的胃蛋白酶未能将其完全降解，SBA进入肠道后又不能被胰蛋白 酶降解，有活性的SBA将与小肠黏膜上皮细胞上的特异性受体结合，破坏肠粘膜结构， 部分被内吞入上皮细胞，进入循环系统，进而对动物体产生一系列的抗营养作用。因此 富含豆类的食品和饲料在加工处理阶段对凝集素进行灭活及国家质检部门对其进行含 量的严格检测是十分必要的。 关键词：大豆凝集素，胃蛋白酶，胰蛋白酶，降解，免疫活性 on of to and StudyStability SoybeanAgglutininPepsinTrypsin Abstract Inthis usedto the to and researeh,purifiedsoybeanagglutinin(SBA)were studystabilitypepsintrypsin weretwo inanimal degradation加vitro．which ofSBAwere principalproteinasesbodies．Proteolyticdegree methodofsodiumsulfate analyzedby dodecylpolyaerylamide gel ofSBAweredetectedindirect lmmunosorbent ofimmunocompetence by competitiveEnzyme·Linked Assay(ELISA)inprocessofproteolysis． wasisolated PurifiedSBA byaN-acetyl-galacotsamine-epoxy-activedsepharo