蒙药特润舒都乐母液浸膏及其主要单体通过tlr4的抗炎信号转导机制研究.pdfVIP

摘 要 蒙药特润舒都乐(TRSDL)是课题组为治疗奶牛乳房炎而配置的，经多年研究 应用于治疗奶牛乳房炎的抗炎免疫复方。发现蒙药特润舒都的水母液浸膏也具有良好 的抗炎和提高机体免疫力的作用。研究复方蒙药特润舒都乐水母液浸膏及其主要活性 成分的抗炎免疫机制，为蒙药特润舒都乐治疗奶牛乳腺炎提供理论依据，实验方法和 结果如下：。 ①采用细菌脂多糖LPS诱导小鼠RAW264．7细胞构建炎症细胞模型。 殖作用的影响，结果：低浓度TRSDL水母液浸膏(1．00,5．00、10．00、25．00 mg／mL) 对小鼠RAW264．7细胞没有生长抑制作用，与不加药物的空白对照组相比没有显著性 la la 没食子酸32g／L和盐酸小檗碱40mol／L分别单独作用48h能够明显抑制 够显著抑制RAW264．7细胞的生长(p0．05)。 lL．1、IL．6、TNF．旺、TLR4及NF．r．B TNF．Q蛋白质的表达，Western 母液浸膏浓度依赖性地抑制LPS诱导的小鼠RAW264．7细胞TLR4、NF．r,B mRNA和 蛋白质的表达。 RAW264．7细胞增殖率的影响，结果：单体栀子苷、没食子酸、盐酸小檗碱及3种单 细胞增殖的抑制作用(pO．05)。 酸、盐酸小檗碱及3种单体复合物能够显著抑制LPS诱导的小鼠RAW264．7细胞的 IL．1、IL．6及TNF一0t表达，与蒙药特润舒都乐水母液浸膏结果均一致。 ⑥进一步运用Western 分的单体及复合物对LPS诱导的RAW264．7细胞p-11《53 白表达和P65与启动子结合活性的影响。结果：TRSDL单体栀子苷、没食子酸、盐 酸小檗碱及3种单体组成的复合物、NF．r．B抑制剂PDTC和地塞米松不影响总p65 RAW264．7细胞TLR4mRNA含量和蛋白质表达，与蒙药特润舒都乐水母液浸膏结果 一致。单体栀子苷、没食子酸、盐酸小檗碱、3种单体复合物、NF．r．B抑制剂PDTC 活性(pO。05)。 综上所述，实验成功构建了细菌脂多糖LPS诱导小鼠RAW264．7细胞炎症细胞 模型；确定了蒙药特润舒都乐水母液浸膏及其主要活性成分的用药量：对小鼠 液浸膏的主要活性成分单体栀子苷、没食子酸和盐酸小檗碱分别选用文献中常用的 la 20mmol／L、32 umol／L；蒙药特润舒都乐水母液浸膏能够显著抑制LPS诱 g／L、40 导RAW264．7细胞的TNF．Q、IL．1和IL．6mRNA含量及其蛋白质的表达，同时在转 录水平和蛋白质水平显著抑制其TLR4和NF．r,B含量，提示蒙药特润舒都乐水母液 浸膏可通过TLR4．NF．1cB通路发挥抗炎免疫作用。蒙药特润舒都乐的3种单体及其 TNF．Q的表达。同时，可初步推测3种单体及其复合物抑制LPS诱导的小鼠巨噬细 13 关键词：TRSDL；LPS；RAW264．7；TLR4；NF—K Active onS EffectsofTRSDLExtractandits Ingredientignal TransductionMechanismTLR4 by Abstract TRSDL，an immune our Mongolian anti—inflammatorycompound，ispreparedby that researchaSanalternativeforantibioticstotreatmastitis．Itwas TRS