野桑蚕人工饲育其cyp6基因cdna片段克隆的研究.pdfVIP

野桑蚕人工饲育及其CYP6基因eDNA片段克隆的研究 中文提要 中文提要 mandarina 农林害虫中有80％为鳞翅目昆虫，桑园害虫野桑蚕(Bombyx M．)属 鳞翅目蚕蛾科，和经济昆虫家蚕(Bombyxmori工．)具有共同的祖先，对野桑蚕和家 蚕进行抗性方面的比较研究，将为鳞翅目害虫的防治和家蚕抗性育种提供重要的 理论依据。已有研究表明，P450超家族中的第六家族CY_P6和昆虫抗药性有关。 野桑蚕是野外昆虫，供试虫源的均一性和全年不断供给很困难，为解决这一难题， 本文首先研究了中国野桑蚕的人工孵化及人工饲育，并对其CYP6基因cDNA片 段进行了研究。 1．搜集了野桑蚕越年卵，进行了即时浸酸、冷藏浸酸、滞育卵冷藏浸酸和越 年卵春季催青前浸酸。结果表明，野桑蚕越年卵即时浸酸，以盐酸比重1．065～ 1．075，液温46℃，时间5rain为宜；冷藏浸酸，以盐酸比重1．092，液温47．8℃， rain 时间6min为宜；滞育卵冷藏浸酸，以盐酸比重1．092、液温47．8℃、时间6 d)愈长孵化率愈高的倾向：越年卵春季催青前以盐酸 浸酸，没有冷藏日数(80～100 比重1．092、液温47．8℃、时间6rain浸酸，可以明显缩短孵化期，提高孵化率。 2．用家蚕低成本饲料饲育野桑蚕，在催青期温度25℃、饲育温度27～25℃、 幼虫期20--48d，雌、雄蛹体质量分别为O．45 d，雌蛾平均 g、0．25g，蛹期17～23 产卵266粒，产滞育卵的母蛾占45．O％。 3．分别以野桑蚕和家蚕的总RNA为模板，采用特异引物，利用RT-PCR法均 DQ504437)。序列比对结果表明，野桑蚕与家蚕核苷酸序列有22个碱基的差异， 同源性为98．0％，氨基酸序列有6个氨基酸差异，同源性为98．4％。序列特征和比 对显示，野桑蚕和家蚕的1101bp的eDNA片段为CYP6家族新成员。 关键词：野桑蚕人工孵化人工饲料育CYP6克隆 作 者：赵华强 指导老师：沈卫德 野桑蚕人工饲育及其CYP6基因cDNA片段克隆的研究 英文提要 M．with Theresearchof mandarina feedingBombyx the ofitscDNA artificialdietand cloning fragment from CYP6 family Abstract for andforest accounts 80％of agricultural pests， Lepidoptedd approximately field