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A.过程①需要DNA连接酶 B.过程②需要限制性核酸内切酶 C.目的基因Ⅰ的碱基序列是已知的 D.若某质粒能与目的基因Ⅰ重组,则该质粒与Ⅰ的碱基序列相同 【解析】 DNA连接酶是将两个DNA分子的黏性末端或平末端的“缝隙”连接起来,而过程①是两条链的碱基互补配对,不需要DNA连接酶,A项错误;限制性核酸内切酶是用来切割DNA的,而过程②不需要,B项错误;当某质粒与目的基因用限制酶切割后有互补的黏性末端,就可以形成重组DNA分子,D项错误。 【答案】 C 3.(2012·课标)根据基因工程的有关知识,回答下列问题: (1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有________和________。 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下: AATTC……G G……CTTAA 为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是________________。 (3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即________DNA连接酶和________DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是________,产物是________。若要在体外获得大量反转录产物,常采用________技术。 (5)基因工程中除质粒外,________和________也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_____________。 【解析】 此题考查基因工程应用的相关知识。(1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有黏性末端和平末端两种类型。(2)为使运载体与目的基因相连,应使二者被切割后产生的末端相同,故用另一种限制酶切割产生的末端必须与EcoRⅠ切割产生的末端相同。(3)根据酶的来源不同,DNA连接酶分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。(4)以RNA为模板,合成DNA的过程称为逆转录,若要体外获得大量DNA分子,可以使用PCR技术。(5)在基因工程中,通常利用质粒作为运载体,另外噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。(6)大肠杆菌作为受体细胞时,常用Ca2+处理,使之成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞。 【答案】 (1)黏性末端 平末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同(其他合理答案也可) (3)大肠杆菌 T4 (4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR (5)噬菌体 动植物病毒(其他合理答案也可) (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱(其他合理答案也可) 1.蛋白质工程的基本原理 2.蛋白质工程与基因工程比较 项目 蛋白质工程 基因工程 区别 过程 预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列 获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需蛋白质 定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品 结果 生产自然界没有的蛋白质 一般是生产自然界已有的蛋白质 联系 蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质,必须通过基因修饰或基因合成实现 请回答: (1)在下列含有ATP和有关的酶的试管中,大量而快捷的获取Bt基因的最佳方案是图中的 ( ) (2)写出b过程表达式________________。 (3)胰岛素是治疗依赖型糖尿病的特效药物,但是天然胰岛素在人体内寿命只有几小时,重症病人每天得注射好几次药物,给病人增加了不便和痛苦。通过蛋白质工程改变胰岛素的空间结构,以延长胰岛素的半衰期,得到长效胰岛素;还可以在不改变胰岛素活性部位结构的前提下,增强其他部位的结合强度,使之难以被酶破坏,从而增强其稳定性,如图是用蛋白质工程设计长效胰岛素的生产过程。 ①构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是________。 ②通过DNA合成形成的新基因应与________结合后转移到____________________中才能得到准确表达。 ③若要利用大肠杆菌生产上述长效胰岛素,需用到的生物工程有________和发酵工程。 ④用蛋白质工程生产的胰岛素,与天然胰岛素比较,显著的优点是________________________。 ⑤图解中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是什么?____________________________________。 【解析】 (1)DNA复制需要以脱氧核苷酸为原料,以DNA为模板在适宜条件下合成。 (2)基因表达过程包括转录和
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