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CIK细胞免疫过继治疗恶性肿瘤的临床观察 　　摘要： 目的：观察恶性肿瘤患者输注细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer，CIK）疗效。方法：用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞，置于1640培养基培养，用细胞因子IFN-γ、IL-2、CD3诱导扩增，将扩增后的CIK细胞输注到100ml生理盐水输给患者，采用流式细胞仪分析患者输注前后T细胞亚群的变化。结果：患者接受CIK细胞治疗后，T细胞亚群百分数和绝对值均明显提高，绝大部分患者食欲改善，睡眠障碍减轻，疼痛得到缓解。结论：CIK细胞免疫过继治疗恶性肿瘤安全有效，且无明显毒副作用。 　　关键词： CIK细胞 免疫治疗 恶性肿瘤 　　继手术、放化疗之后，细胞免疫治疗肿瘤已受到人们越来越多的关注，而输注细胞的数量和质量是保证临床疗效的关键[1]，因此，如何在体外培养出高增殖高活性的抗肿瘤效应细胞成为大家关注的焦点[2]。CIK细胞是一种免疫杀伤细胞，具有高增殖和高细胞毒性，能特异性杀伤肿瘤细胞。现将本院应用CIK细胞治疗85例肿瘤患者的近期疗效报告如下。 　　1、材料与方法 　　1.1临床资料 　　我院在2012年到2013年，对85例恶性肿瘤病人行CIK细胞回输，其中男53例，女32例；年龄26岁到75岁，其中肝癌10例，胃癌19例，乳腺癌18例，肺癌31例，食道癌7例。 　　1.2试剂与仪器 　　淋巴细胞分离液：中国科学院生物工程研究所；RPMI1640培养基：美国wigma公司；IL-2：英国pepro tech公司；IFN-γ：英国pepro tech公司；CD3：美国 Ancell Corporation公司。低温高速离心机：英国Beck man公司；HF212 UV CO2恒温培养箱：上海力申科技有限公司；倒置相差显微镜：日本Olympus公司。 　　1.3实验方法 　　采用淋巴细胞分离液分离患者外周血单个核细胞，悬浮于1640培养基培养，第一天加入IFN-γ（1000U/ml）20μl，置37℃，5%CO2培养箱中；24 小时后，加CD3 单抗（ 100mg/mL）100μl，IL-2（500μ/mL）40μl；72 小时后，补加培养液和IL-2。培养第3天时进行细菌培养，培养结果阴性后，洗涤注入100mL生理盐水回输给患者。 　　2、结果 　　患者接受CIK细胞免疫过继治疗后，T细胞亚群百分数和绝对值均明显提高，经流式细胞仪检测CD3、CD8、CD56与输注前对比，70%患者有所提高，20%患者无改变，10%患者降低。绝大部分患者食欲得到改善，睡眠障碍减轻，疼痛得到缓解。 　　3、讨论 　　我院自体CIK细胞回输治疗85例恶性肿瘤患者，绝大部分患者治疗有效，患者回输CIK细胞后感觉明显好转。通过流式细胞仪分析发现患者体内T细胞亚群百分数和绝对值提高者达70%，有效改善了患者的生命体征，提高了患者的生活质量，延长了患者的生存时间，为肿瘤患者提供了更加有效的治疗手段。 　　CIK细胞在医学上被称为肿瘤的细胞导弹，它识别肿瘤的能力强，且不会杀伤人体的正常免疫细胞[3]。CIK细胞作为目前生物治疗的新手段，其杀瘤活性强，且无明显的毒副作用，已经越来越受到人们的重视，给越来越多的患者带来福音[4]。 　　参考文献： 　　[1]李敏， 邓海峰， 陆明洋， 等. CIK治疗前后肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞变化研究. 中国实验诊断学， 2011，6（15）：1051-1053. 　　[2]田静， 卢红， 宿向东， 等. CIK细胞治疗放化疗后肿瘤患者的临床观察. 肿瘤预防与治疗， 2009，3（23）：269-271. 　　[3]石旦， 沈月平， 裴红蕾， 等. 细胞因子诱导的杀伤细胞治疗胃癌对其无瘤生存的影响. 中华实验外科杂志， 2012，3（29）：395-397. 　　[4]黄建云， 李印， 周敏仪， 等. 健康人CIK细胞输注对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响. 岭南急诊医学杂志， 2012，3（17）：175-177.