减蛋综合征病毒邻体、纤维蛋白和六邻体的原核表达及抗原性分析.pdfVIP

摘要 摘 要 减蛋综合征(EggDrop 以产蛋鸡产薄壳或无壳蛋，产蛋率严重下降为主要特征的传染病，该病在世界范围内的发生 和流行给养鸡业带来了巨大的经济损失。 本研究以EDSV京9ll株为基础材料，经过鸭胚繁毒、提取DNA，并以此为模板，参 异性引物，PCR扩增出目的基因，并将其克隆到pMDl8．T载体上，转化到宿主菌TGl感受 态细胞中，经质粒PCR、酶切鉴定以及测序证明，最终得到了该株病毒包含52／55k、llIa、 EDSV京9l1株与其它腺病毒进行核苷酸和氨基酸序列比对，结果显示EDSV京911株与 AV．127株高度同源，除纤维蛋白和pV肜b，其它蛋白的同源性都在99．00％以上，其中五邻 株可能为同一基冈型。同时，根据序列比对结果绘制了五邻体、六邻体和巯基内肽酶系统发 生树，结果显示EDSV与OAV287和BAdVq遗传关系最近。 根据已获得的京911株核苷酸序列，并参考AV．127株的五邻体、纤维蛋白和六邻体全 基因序列，分别设计合成了带有酶切位点的特异性引物，最终克隆得到包括起始密码子和终 小约54．0ku、69。7ku和1 检测，重组五邻体蛋白具有较好的抗原性。 本研究成功克隆了EDSV京9ll株部分基因，为构建EDSV载体打下了良好的基础；同 时利用原核表达系统成功表达了EDSV的三个主要结构蛋白，重组五邻体蛋白具有较好的抗 原性，为进一步研究EDSV结构蛋白和建立新的EDSV检测方法奠定了基础。 关键词：减蛋综合征病毒；五邻体；纤维蛋白；六邻体；抗原性分析 ‘Abstract and ProkaryoticExpressionAntigenicity ofPenton、FiberandHexonof Analysis Egg Virus DropSyndrome Abstract avirulent diseasecausedEDSVwiththe infectious EggDropSyndrome(EDS一76)WaS by maincharacteristicsof shellessorsoftshelledand its laying eggs decreasingegglaying，and occuRenceand intheworld lose causedenormous to epidemic economy industry． poultry tothenucleotide ofEDSVAV-127strainfromthe of Genbank，8 According sequence pairs were ofthe chain oligonucleotideprimer designed Primer5．0．Using byusing