地塞米松和环丙星对犬软骨细胞的影响.pdfVIP

中文摘要 摘要 目的：糖皮质激素有强大的抗炎作用，可抑制肿瘤坏死因子对细胞产 生的毒性作用，临床上广泛用它来治疗各种疾病，包括非细菌性骨关节炎 等。地塞米松能减轻关节的炎症，但长期大量使用易导致骨质疏松或股骨 头坏死等并发症。治疗感染性关节炎常是地塞米松和环丙沙星等喹诺酮类 药联合应用，但临床上常有关于喹诺酮类药引起软骨毒性的报道。因此， 选择糖皮质激素和喹诺酮类药的临床常用药物地塞米松和环丙沙星，深入 研究其对软骨细胞生物学特性的影响，对指导临床用药具有重要意义。 方法：本实验利用组织块法体外分离培养幼龄犬关节软骨细胞，利用 0一、 第3代纯培养的软骨细胞进行试验研究，无血清培养液内分别含有1 10～、1 5、O．1、O．05 O墙g／L地塞米松和O．1 g／L环丙沙星；分别定时观察软骨 细胞增殖和细胞蛋白质合成并利用荧光定量PCR检测软骨细胞II型胶原基 因mRNA表达情况，以分析地塞米松和环丙沙星对软骨细胞活力的影响； mRNA表达水平，利用扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构的变化，以 分析观察地塞米松和环丙沙星对软骨细胞有无损伤。 结果：细胞培养液中加入地塞米松24h内细胞增殖较快(以1 O。69／L 为明显)，随后细胞增殖减慢，以1049／L地塞米松抑制作用最为显著；软 骨细胞内总蛋白质浓度略有升高，以10币g／L地塞米松的作用较明显。但 用环丙沙星作用24h后可明显抑制软骨细胞的增殖；随时间的延长，抑制 作用增强；剂量越大，抑制作用越强；环丙沙星尚可导致软骨细胞总蛋白 的含量降低，以O．1 59／L、O．1g／L的浓度为明显(尸0．01)。 荧光定量PCR检测结果表明，地塞米松和环丙沙星均使犬软骨细胞II 塞米松。 电镜下，地塞米松组的软骨细胞表面粗糙，可见较多的畸形核，核仁 中文摘要 明显；胞质内有大量空泡状变性线粒体，并出现线粒体的髓样变。环丙沙 星组的软骨细胞表面微绒毛变少，细胞核溶解或固缩，染色质形成斑块状 散布于核内，细胞体积增大；细胞质内细胞器数量明显减少，胞质中空泡 增多；高度扩张的内质网形成了大囊泡，有的细胞器膜断裂并脱落于囊腔 内，呈絮状；部分线粒体呈髓样变。 结论：本实验建立了犬关节软骨细胞的原代培养方法；地塞米松和环 丙沙星可抑制软骨细胞增殖，抑制细胞合成蛋白质和II型胶原；二者均有 mRNA表达下调和软骨细胞超微结构的破坏。 关键词：犬；软骨细胞；地塞米松；环丙沙星 英文摘要 ABSTRACT Glucocorticoids，with ef能cts， Objective： powerfulanti—inflammatory factor are inhibitthetoxicef先ctoftumornecrosison cells，which may widely usedtotreatvarious asnonbacterialosteoarthritisandsoon． diseases，such butDEX