意大利蜂工蜂胎炎免疫作用机理的研究及其功效成分的初步筛选.pdfVIP

致谢 本论文在导师胡福良副教授的细悉心指导下完成。我在浙江大学 学习期间始终得到胡福良导师的关心、支持和鼓励。在论文完成过程 中得到胡福良导师的支持和资助。在论文完成之际向恩师表示衷心的 感谢!胡老师严谨踏实的治学态度和工作作风，及其平易近人的待人 态度给我留下了深刻的影响，并将影响我以后的工作与学习。我将牢 记导师的教诲，不辜负导师对我的教育和期望，努力工作学习，争取 为社会作出最大的贡献。 感谢浙江大学为我提供的学习机会，感谢院动物科学学院领导和 老师在思想、学习和生活上给予的指导和帮助! 感谢浙江中医学院动物实验研究中一i5陈民利、应华忠以及吕建敏、 徐孝平、王德军等老师在实验过程中给予我的热心指导与帮助! 感谢朱祥瑞老师，张才乔老师，谢美娜，郑根华，詹耀锋，玄红 专等同学在资料检索、实验过程和论文写作及学习、生活等方面为我 提供的大力支持与友好帮助。 感谢我的家人，因为你们的支持，使我能顺利完成我的学业。 最后向参加论文评阅和答辩的全体专家致以最真诚的谢意! 朱威 2004．5 浙江大学硕士学位论、， 摘 要 工蜂虫蛹自古就是药膳两用食品，我国许多中药药典都有工蜂虫蛹用于疾病治疗以 及保健的记录。因其具有较高的开发利用价值，近几年已有一些研究人员对虫蛹的功效 重新进行了探讨并取得了一定成果。本实验采用酶联免疫、荧光分光、紫外分光、免疫 组化等技术，观察比较工蜂胎的水提物和醚提物对多种炎症动物模型的影响，首次在整 体水平、细胞水平、分子水平系统地研究了工蜂胎的抗炎作用及其机理，并对其抗炎免 疫成分进行了初步筛选。结果表明： 1．工蜂胎的水提物能够在一定程度土薄氙炎症区域毛细血管的通透性，能够抑制完全弗 氏佐剂引起的炎盐肿胀，对角叉菜胶引起的炎性肿胀效果不明显，对油酸加LPS两次 打击所致大鼠急性肺损伤有明显的保护作用，能对抗肺水肿的产生；对慢性炎症(棉 球肉芽肿模型)具有显著的抑制作用。而醚提物有一定的趋势，但效果并不明显。 2．工蜂胎的水提物能够减少角叉菜胶致大鼠急性胸膜炎炎症组织中PGE2和总蛋白的含 量，降低炎症组织脂质过氧化物代谢产物(MDA)的含量，减轻炎症发生程度，抑 制炎症组织中自细胞总数的增加。工蜂胎水提物对大鼠肾上腺中胆固醇的含量和vitC 含量影响明显，提示抗炎免疫作用有可能是依赖于垂体．肾上腺皮质系统。但工蜂胎 的醚提物对于炎症介质以及胆固醇和VitC含量的影响不大。 3．工蜂胎水提物对急性炎症渗出液中NO及溶菌酶含量的升高表现出抑制作用，能够对 抗炎症模型内细胞因子IL一6的异常升高，对IL．2和IFN—Y影响不明显，暗示工蜂胎 水提物的抗炎免疫通过作用于B淋巴细胞系统起作用。 4．工蜂胎水提物能够在一定程度上抑制急性肺损伤大鼠支气管上皮细胞中CD54的表 达，阻止核转录因子NF-kB nu,RNA p65的活化，抑制大鼠支气管上皮细胞中NF．kB p65 的表达。提示工蜂胎水提物主要通过抑制炎症细胞中NF．kB p65的活化及其NF—kB p65 mRNA的转录增加控制炎症反应的中心环节，使有害细胞因子的产生减少，傈护 机体免受有害刺激的进一步损伤，从而达到有效抗炎哥的。工蜂胎的醚提物对于CD54 的表达、NF．kB p65的活化影响不大。 浙江大学硕I．学位论艾 5工蜂胎的功效成分可能主要存在于其水提物中，工蜂胎的水提物呈现出较为明显的抗 炎免疫效果，而醚提物有一定的抗炎趋势，但效果跟工蜂胎的全组分相比较，有一定