旱柳基因转化再体系的建立和农杆菌介导的badh基因转化的研究.pdfVIP

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旱柳基因转化再体系的建立和农杆菌介导的badh基因转化的研究

旱柳再生体系的建立和农杆菌介导的BADH基因转化 的研究 摘 要 本试验所尉早挪品系Q106是山东销东营市的地方优良新晶种,与菇它早柳 蕊种相比,具有~定的抗旱、耐盐、耐瘠薄、挠熙沙能力,并恩商速生、成杏才 早等优点。在生态环境中起着狠重要{乍用,同时也是良好的园林绿化材料。土 壤舷渍化是影响农业生产和生态环境的一个重要因素。它使大爨的国±荒芜, 生态环境更加恶劣。因此,赫碱地资源开发刹用有着及其重要的社会意义。翠 柳的最赢时赫性为4%0,超过此极值,冀生长受到限制、甚至死亡。对此本实验 一步提商旱柳的耐盐性和抗旱性,扩大熟适宜的种植范圈。 主要研究缝果如下: 1. 旱柳褥生体系的建立: 以袋芽茎段进行无藏材料扩繁时MS+BA0.4 g mg/L+NAA0。2mg/L+蔗糖30 /L和BA0.4 g/L;MS+BA0.4 men.+NAA0.2 mg/L+蔗糖30 mg/L mg/L+NAA0.4 果最好,芽分化率可达88t3%;擦出芬愈侥组织块接秽列隧搬 个;壮势培莠纂必MS+BA0,2 mg/L+NAA0,lmg/L:,圭根培器基为1/2MS隧搬 GA30.2 mdh,嫩根效果好。 mg/L+NAA0.5 2。 BADH基因转化钵系涎建立。 400 mg/L的头孢酶素作为抗菌素抑制和去除农杆菌最佳,且对愈伤组织和 10 缰壤莹生长影嚼不夫;褒Kanmg/e眩愈臻缀织竭纯死亡率97%,卡那霉豢 (Kan)15 mg/L时组增荫白化毵亡率为100%;利用农杆菌介导,以愈伤组织作 鸯强专妻髂逑萼亍缓染,侵染孵搬入10 养基活化农杆菌;菌液浓度OD值0.3-0.5、预培养时间3d,共培养时间3d有利 予提蔫辖纯搴;转{宅小芽经OUS每裳稔溅帮卡郑选择(90d),获褥了8拣转化 植株,初步说明外源基因整合到植株基因组DNA中。研究结粜初步建立了一个 照妊数拣本农橙蘧套譬熬基霞转纯方法。 关键词:早柳;再生体系;基因转化;根癌农杆菌介导法;BADH基因 Establishmentof and RegenerationSystem Agrobaeterium mediatedBADH Gene Transformation ofSalix System matsudana 矗BSTl迭C零 融激matsudanaanew into鞠rLabfromtw Q1鲻is varie虢which逸introduced he in to ofDONGYIN0 showsf- city Willows,Q106

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