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旱柳基因转化再体系的建立和农杆菌介导的badh基因转化的研究
旱柳再生体系的建立和农杆菌介导的BADH基因转化
的研究
摘 要
本试验所尉早挪品系Q106是山东销东营市的地方优良新晶种,与菇它早柳
蕊种相比,具有~定的抗旱、耐盐、耐瘠薄、挠熙沙能力,并恩商速生、成杏才
早等优点。在生态环境中起着狠重要{乍用,同时也是良好的园林绿化材料。土
壤舷渍化是影响农业生产和生态环境的一个重要因素。它使大爨的国±荒芜,
生态环境更加恶劣。因此,赫碱地资源开发刹用有着及其重要的社会意义。翠
柳的最赢时赫性为4%0,超过此极值,冀生长受到限制、甚至死亡。对此本实验
一步提商旱柳的耐盐性和抗旱性,扩大熟适宜的种植范圈。
主要研究缝果如下:
1. 旱柳褥生体系的建立:
以袋芽茎段进行无藏材料扩繁时MS+BA0.4 g
mg/L+NAA0。2mg/L+蔗糖30
/L和BA0.4 g/L;MS+BA0.4
men.+NAA0.2
mg/L+蔗糖30 mg/L
mg/L+NAA0.4
果最好,芽分化率可达88t3%;擦出芬愈侥组织块接秽列隧搬
个;壮势培莠纂必MS+BA0,2
mg/L+NAA0,lmg/L:,圭根培器基为1/2MS隧搬
GA30.2 mdh,嫩根效果好。
mg/L+NAA0.5
2。 BADH基因转化钵系涎建立。
400
mg/L的头孢酶素作为抗菌素抑制和去除农杆菌最佳,且对愈伤组织和
10
缰壤莹生长影嚼不夫;褒Kanmg/e眩愈臻缀织竭纯死亡率97%,卡那霉豢
(Kan)15
mg/L时组增荫白化毵亡率为100%;利用农杆菌介导,以愈伤组织作
鸯强专妻髂逑萼亍缓染,侵染孵搬入10
养基活化农杆菌;菌液浓度OD值0.3-0.5、预培养时间3d,共培养时间3d有利
予提蔫辖纯搴;转{宅小芽经OUS每裳稔溅帮卡郑选择(90d),获褥了8拣转化
植株,初步说明外源基因整合到植株基因组DNA中。研究结粜初步建立了一个
照妊数拣本农橙蘧套譬熬基霞转纯方法。
关键词:早柳;再生体系;基因转化;根癌农杆菌介导法;BADH基因
Establishmentof and
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